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桑叶成分测定方法 茶多酚的测定（GB/T 8313-2002） 本标准适用于茶叶中茶多酚的测定，不适用于茶叶提取物制品中茶多酚的测定。 引用标准：GB/T 8302-2002 茶取样；GB/T 8312-2002 茶咖啡碱测定； GB/T 8303-2002 茶磨碎试样的制备及其干物质含量测定； 茶多酚（tea polyphenols）：茶叶水浸出物中与亚铁离子产生络合反应的酚类物质。 原理：茶叶中多酚类物质能与与亚铁离子形成紫蓝色络合物。用分光光度法测定其含量。 设备：分析天平、分光光度计。 试剂和溶液：水为蒸馏水。 　　1、 HYPERLINK /view/63114.htm \t _blank 酒石酸亚铁溶液：称取1g (准确至0.0001g)? HYPERLINK /view/1730.htm \t _blank 硫酸亚铁和5g (准确至0.0001g)酒石酸钾钠，用水溶解并定容至1L(溶液应避光，低温保存，有效期一个月)。 2、pH7.5 HYPERLINK /view/46468.htm \t _blank 磷酸盐缓冲液： 1/15mol/L磷酸氢二钠: 称取23.9g十二水磷酸氢二钾钠，加水溶解后定容至1L。 1/15mol/L HYPERLINK /view/249830.htm \t _blank 磷酸二氢钾：称取经110度烘干2h的磷酸二氢钾9.08g，加水溶解后定容至1L。 取上述磷酸氢二钠溶液85ml和磷酸二氢钾溶液15ml混合均匀。 操作方法 　　1 取样：按《茶 取样》的规定取样。 　　2 试样的制备：按《茶 磨碎试样的制备及其干物质含量测定GB/T 8303-2002》的规定，制备试样。 3 测定步骤： (1)试液的制备：按《茶 水浸出物测定GB/T 8312-2002》中的11.1的规定，制备试液。 (2)测定：准确吸取上述(1)试液1mL，注入25mL的容量瓶中，加水4mL和酒石酸亚铁溶液5mL，充分混合，再加pH7.5的缓冲液至刻度，用10mm比色杯，在波长540nm处，以试剂空白溶液作参比，测定吸光度(A)。 4、结果计算：计算方法和公式 茶叶中茶多酚的含量，以干态质量百分率表示，按下式计算： 茶多酚(%)=【(A×1.957×2)/1000】×【L1/(L2×M0×m)】×100 式中： L1——试液的总量，mL； L2——测定时的用液量，mL； M0——试样的质量，g； m——试样干物质含量百分率，%； A——试样的吸光度； 1.957——用10mm比色杯，当吸光度等于0.50时，每毫升茶汤中含茶多酚相当于1.957mg。 5、如果符合重复性的要求，则取两次测定的算术平均值作为结果。 重复性同一样品的两次测定值之差，每100g试样不得超过0.5g。 茶游离氨基酸总量的测定（GB/T 8314-2002） 本标准适用于茶叶中游离氨基酸总量的测定。 引用标准：GB/T 8302-2002 茶取样；GB/T 8312-2002 茶咖啡碱测定； GB/T 8303-2002 茶磨碎试样的制备及其干物质含量测定； GB/T 8313-2002 茶茶多酚测定 定义： 游离氨基酸free amino acids：茶叶水浸出物中呈游离状态存在的具有a-氨基的有机酸。 原理：a-氨基酸在ph8.0条件下与茚三酮共热，形成紫色络合物，用分光光度法在特定波长下测定其含量。 仪器和用具：分析天平；分光光度仪。 试剂和溶液：所用试剂应为分析纯，纯度不低于99%，水为蒸馏水。 1、pH8.0 HYPERLINK /view/46468.htm \t _blank 磷酸盐缓冲液： 1/15mol/L磷酸氢二钠：称取23.9g十二水磷酸氢二钾钠，加水溶解后定容至1L。 1/15mol/L HYPERLINK /view/249830.htm \t _blank 磷酸二氢钾：称取经110度烘干2h的磷酸二氢钾9.08g，加水溶解后定容至1L。 取上述磷酸氢二钠溶液95ml和磷酸二氢钾溶液5ml混合均匀。 2、2%茚三酮溶液： 称取水合茚三酮2g，加50ml水和80mg二水合氯化亚锡搅拌均匀。分次加少量水溶液，放在暗处，静置一昼夜，过滤后加水定容至100ml。 3、茶氨酸或谷氨酸标准液： 称取100mg茶氨酸或谷氨酸溶于100ml水中，作为标准吸取5ml母液，加水定容50ml作为工作液（1ml含茶氨酸或谷氨酸0.1mg）。 操作方法： 取样： GB/T 8302-2002 试样制备： GB/T 8303-2002 测定步骤： 3.1 试液的制备： GB/T 8312-2002中11.1的规定。 3.2 测定： 准确吸取试液（3.1）1ml，注入25ml的容量瓶中，加0.5ml pH8.0 HYPERLIN