乌司他丁对炎症、组织灌注及脏器损伤的影响课件.pptx

乌司他丁对炎症、组织灌注及脏器损伤的影响目录乌司他丁的药理作用乌司他丁对血管内皮、血管通透性和灌注的影响乌司他丁对脏器功能的影响乌司他丁（UTI）是天然的炎症调节物质O-硫酸软骨素糖链：与细胞、钙结合，稳定溶酶体膜、抑制炎性细胞因子释放C端K区 ：抑制多种水解酶N-糖链：调节内皮细胞与单核细胞、粒细胞、淋巴细胞的结合力N端K区：抑制组织蛋白酶G和弹性蛋白酶Michael J. et al.Clin Chem Lab Med 2005;43(1):1–16乌司他丁抑制炎症介质及溶酶体酶释放刺激因子硫酸软骨素糖链抑制钙内流，阻断信号转导，减少TNF-a/IL-1?产生结合Ca2+Ca2+XERK1/2 磷酸化XCa2+Ca2+Ca2+Ca2+Ca2+Ca2+Ca+TNF-aTNF-aTNF-aTNF-aTNF-aTNF-aNF-кB/Egr-1活化X结合细胞 TNF-a/IL-1?X稳定细胞膜,抑制TNF-a/IL-1?释放，阻断炎症级联反应稳定溶酶体膜，抑制溶酶体酶释放，减少细胞损害1. Caroline M, et al. Journal of Cell Science 116, 1863-1873(2003) 2. Naohiro Kanayama, et al. BIOCHEMICAL AND BIOPHYSICAL RESEARCH COMMUNICATIONS 238, 560–564 (1997) 3. Hidenori Matsuzaki, et al. CLINICAL AND DIAGNOSTIC LABORATORY IMMUNOLOGY, Nov. 2004, p. 1140–1147 4. Seiji Kanayama, et al. Journal of Endotoxin Research 2007 13: 369乌司他丁抑制多种水解酶酶的分类酶的名称抑制50%酶活性的UTI浓度（U/ml）蛋白酶胰蛋白酶6.8α-糜蛋白酶9.4粒细胞弹性蛋白酶5.6组织蛋白酶G15.7纤溶酶34.7胰弹性蛋白酶1,675肠激酶3,000脂酶脂肪酶230糖类水解酶透明质酸酶75淀粉酶2,500乌司他丁抑制胰蛋白酶、α-糜蛋白酶、透明质酸酶、弹性蛋白酶和纤溶酶等多种酶的活性乌司他丁对粒细胞弹性蛋白酶的抑制活性最强蛋白酶抑制剂对中性粒细胞介导的内皮细胞损伤的抑制作用中性粒细胞/炎症介质损伤内皮细胞 TNF-a + IFN-γ培育后洗脱的HUVEC（51Cr标记），加入不同因子激活的中性粒细胞混悬液，51Cr释放率和内皮细胞死亡率明显升高多种因子培育后洗脱的HUVEC（51Cr标记），在TNF-a激活的中性粒细胞介导下，51Cr释放率和内皮细胞死亡率明显升高Keigo Nakatani, et al. Journal of Leukocyte Biology Volume 69, February 2001乌司他丁抑制中性粒细胞分泌弹性蛋白酶，减轻内皮细胞损伤 经TNF-a + IFN-y培育后洗脱的HUVEC，加入TNF-a激活的中性粒细胞，和不同浓度的乌司他丁/加倍酯/抑肽酶。只有乌司他丁培育组，细胞毒性释放呈浓度依赖性降低Keigo Nakatani, et al. Journal of Leukocyte Biology Volume 69, February 2001乌司他丁抑制弹性蛋白酶活性，减轻内皮细胞损伤 弹性蛋白酶（ug/ml）乌司他丁（U/ml）TNF- a + IFN- y培育后洗脱的HUVEC ，加入25ug/ml弹性蛋白酶，以及不同浓度的乌司他丁培育后，细胞毒性（表示内皮细胞损伤程度）释放呈浓度依赖性下降TNF- a + IFN- y培育后洗脱的HUVEC，加入不同浓度的弹性蛋白酶，继续培育12h。内皮细胞51Cr释放率呈浓度依赖性升高Keigo Nakatani, et al. Journal of Leukocyte Biology Volume 69, February 2001乌司他丁对严重脓毒症血清损伤人肺血管内皮细胞保护作用的实验研究2011年发表于《中国呼吸与危重监护杂志》李新宇等,乌司他丁对严重脓毒症血清损伤人肺血管内皮细胞保护作用的实验研究 .中国呼吸与危重监护杂志. 2011; 10(6):547-551.研究设计研究目的：探讨乌司他丁保护严重脓毒症血清损伤离体人肺血管内皮细胞(PMVECs)的机制。人PMVECs细胞株患者血清组(S组）：加10%严重脓毒症患者血清的RPMI1640培养基健康血清组(H组)：加10%健康人血清的RPMI1640培养基正常培养组(N组）：加10% FBS的RPMI1640培养基乌司他丁组（U组）：加1000U/ml UTI