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D TATA A B DNA TATA F E 反式作用因子 ------ 直接或间接辨认、结合顺式 作用元 件并影响其功能的蛋白质。 RNA聚合酶与模板DNA的结合需一系列转录因子( TF )的参与。 RNA聚合酶 2、 转录延长 1 、? 亚基脱落,RNA – pol 聚合酶核心酶变构, 与模板结合松弛,沿着DNA模板前移; 2 、在核心酶作用下,NTP不断聚合,RNA链 不 断延长。 (NMP) n + NTP ?? (NMP) n+1 + PPi 5? 3? DNA 原核生物转录过程中的现象 核糖体 RNA RNA聚合酶 3 、 转录终止 ------ RNA聚合酶在DNA模板 上停止前进, 转录产物RNA链从转录复合物上脱落下来 (一) 原核生物的转录终止 1、 依赖 ρ 因子(Rho) 的转录终止 2、 不依赖 ρ 因子的转录终止 DNA模板上靠近终止处,有些特殊的 碱基序列,转录出RNA后,RNA产物形成 特殊的结构来终止转录。 ρ因子 1. 识别结合富含C的RNA链 功能 2. ATPase活性 3. 解螺旋酶活性 RNA 聚合酶 ρ因子附在RNA链上 ρ因子 RNA 链形成一个发夹结构,转录停止,ρ因子利用ATP能滑行 ρ因子发挥解螺旋酶活性,解开发夹和RNA-DNA 依赖Rho因子的转录终止 TTGCAGCCTGACAAATCAGGCTGATGGCTGGTGACTTTTTAGTCACCAGCCTTTTT?? DNA 或 UUUU ˙ ˙ ˙ ˙ ˙ ˙ UUUU ˙ ˙ ˙ ˙ ˙ ˙ 茎环结构 RNA T OH AAA UUU OH UUU OH 不依赖ρ因子的转录终止 5’pppG 5? 3? 3?5? 茎环结构使转录终止: 1,使RNA聚合酶变构 2,使转录复合物趋于解离, RNA产物释放 RNA-pol (二)真核生物的转录终止 —— 和转录后修饰密切相关 5’ ------AAUAAA- 5’ ------AAUAAA-- Poly (A) mRNA 核酸酶 -GUGUGUG AATAAA GTGTGTG 转录终止的修饰点 5’ 5’ 3’ 3’ RNA-pol 六 真核生物转录特点 启动子复杂,某些基因不含TATA box,由起动序列参与基本转录的开始 顺式作用元件:真核生物中转录起始中起转录调控作用的DNA序列 -35区 5 ′-TATA (TATA盒) -70~-110区 CAAT盒 GC盒 (真核TATA序列的位置不像原核-35和-10那样典型,某些真核生物基因也可以没有TATA序列) 转录因子与反式作用因子 转录因子与反式作用因子: 调节基因表达的蛋白为转录因子;它们与特异的顺式作用元件相互作用,并激活另一基因的转录 TATA TF II D TF II A TF II B RNA-pol II/TF II F TF II E PIC 1 2 3 4 5 转录起始复合物 结合顺序 真核转录的转录终止序列,在3端之后有共同序列AATAAA及多个GT序列,mRNA在转录终止序列处被切断 AATAAA GTGTGTG ----- AAUAAA GUGUGUG AAUAAA GUGUGUG 酶切 加尾信号 GC丰富序列 AATAAA GTGTGTG ----- AAUAAA GUGUGUG 酶切 (继续转录,但5’端没有“帽子”,产物被降解) 加尾 转录后的加工 原核RNA不需加工,边转录边翻译 真核RNA需要加工 rRNA tRNA mRNA 5’加帽 3’加尾 剪接 在转录过程中 转录后进行 第三节 真核生物转录后的加工 意义:转录生成的前体RNA,无生物学活性,需加工变为成熟、有活性的RNA 加工种类:剪切与剪接、末端添加核苷酸、修饰、RNA编辑 ?一、mRNA前体的加工 (一)生成特点: 原核 :mRNA是多顺反子(polycistronic),每分子RNA中含几种蛋白质信息,RNA寿命短,转录没完时翻译即开始 ??? ?例:乳糖操纵子,含Z,Y,A三个基因,分别编码半乳糖苷酶、透过酶及乙酰基转移酶 第七章 RNA的转录与转录后加工 孙雅煊 中心法则 (The Central Dogma) 转 录 翻 译 逆转录 复 制 【目的与要求】 1、掌握转录的概念与特点 2、掌握并能叙述原核生物与真核生物中RNA聚合酶的组成及功能 3、掌握RNA转录过程 4、掌握mRNA,tRNA与rRNA转录后主要加工过程 概 述 一、RN
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