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质量保证 检测前 建立标本签收制度,审查申请单与标本是否相符。 标本: 血清和血浆均可,血清更佳。 溶血的标本不能使用,因为可能掩盖抗体引起的溶血; 对输液的病人允许从输液管中抽血,但要用盐水冲洗管道,并弃去最初抽取的5ml血液; 细胞最好洗涤 质量保证 检测前 详细询问病人的病史,包括病人的临床诊断、妊娠史、输血史及近期使用的药物。有妊娠史和输血史的血标本要在48h内留取。 试剂应在有效期内。 实验器材清洁干燥,防止溶血。 质量保证 检测中: 工作人员要有高度的责任感 实验器材要专管专用 RBC须洗涤,RBC浓度与血清比例要适当 严格控制反应条件的一致 有输血史和妊娠史的需同时用酶介质和抗人球蛋白交叉配血 用血量大时供血者之间也应交叉配血 必要时用显微镜观察鉴别 质量保证 检测后: 患者和供血者标本应置4℃冰箱保存7天以备复查。仔细分析配血时的凝集或溶血现象,查明原因。 认真填写报告和登记,核对无误后才能发报告。 如有疑问及时联系临床。 临床意义 保证输血安全:及时纠正定型错误,避免输血反应。 发现亚型和不规则抗体 ABO血型系统中含有抗A1血清与A1红细胞交叉配血时可出现凝集 Rh或其他血型不同时也可发生严重的输血反应 (四) Rh血型鉴定 只使用抗D血清检查被检RBC表面有无D抗原以确定被检者的Rh血型 配血不合、亲子鉴定、家系调查、产前检查、确定纯合子或杂合子时需做Rh血型全部表现型的定型鉴定 Rh血型鉴定常用的方法与评价 1.酶介质法 2.低离子强度盐水实验 3.抗人球蛋白法(Coombs实验) 4.聚凝胺法 5.人源盐水介质抗D试验 6.凝胶微柱法 1.酶介质法 Rh抗体属IgG型不完全抗体,不能在盐水中与相应红细胞发生凝集。 木瓜酶或菠萝酶可破坏红细胞表面的唾液酸,降低其表面负电荷,使红细胞之间的距离缩小;同时酶还可以部分地改变红细胞表面结构,使某些抗原得以暴露,促使Rh血型系统的抗原与相应的不完全抗体IgG抗体反应,从而使红细胞发生肉眼可见的凝集。 本法简单快速,但灵敏度低。 2.低离子强度盐水实验 当降低介质的离子强度时,可减少红细胞外围的离子云,促进IgG型Rh抗体与红细胞结合发生凝聚反应。 当离子强度由0.17降至0.03时,可提高抗D抗体与红细胞结合率,所以在低离子的强度盐水中,能缩短抗原与抗体的反应时间,并提高其灵敏度。 3.抗人球蛋白法(Coombs实验) 最早用于检查不完全抗体的方法,可用作Rh血型鉴定。 被检者血中的不完全抗体与RBC结合形成抗原抗体复合物,使RBC处于致敏状态,抗人球蛋白作为第二抗体,通过连接致敏RBC表面的Rh抗体,与致敏RBC发生凝集反应。 本法虽较灵敏可靠,但操作复杂,费时,试剂贵,不利于急诊检查和血库的大批量工作。 4.聚凝胺法 聚凝胺是带有高价阳离子的多聚季铵盐,溶解后能产生正电荷可中和红细胞表面的负电荷,减少细胞间排斥力,促进Rh抗体致敏的红细胞发生特异性的不可逆凝集。 快速、灵敏、准确性高,应用较广。 5.人源盐水介质抗D试验 免疫球蛋白变性剂作用于人源IgG类抗D血清,使其成为具有大分子IgM性质,在盐水介质中可与相应RBC发生凝聚反应。 操作简单、灵敏、特异,应用广泛,但试剂较贵。 凝胶微柱法(卡式) 原理:微管内有凝胶颗粒和试剂。凝胶颗粒具有分子筛作用,离心后,不凝集的红细胞通过全程进入微管底部,而凝集的红细胞则悬浮停留在颗粒中。 操作标准化,结果特异、准确可靠,重复性好、灵敏度高,但需要特殊试剂和离心机,成本较高。 Rh血型鉴定可能出现假阳性的原因 高蛋白试剂引起缗钱状凝集 纤维蛋白造成的凝块 定型试剂中存在的其它抗体 多凝集细胞造成的假阳性 鉴定器材和试剂血清被污染 Rh血型鉴定可能出现假阴性的原因 受检细胞悬液浓度太高,与试剂血清比例失调。 漏加或错加定型试剂 观察结果时摇动用力过度,摇散弱凝集。 试剂血清保存不当引起变质 RBC表面其他抗体干扰 质量保证 检测前 标本:新鲜,防止污染。 试剂:使用有效期内的合格试剂。抗血清妥善保存,防止污染。 器材:清洁干燥。 质量保证 检测中: 严守操作规程 严格控制反应条件的一致 每次需设置阴性、阳性、试剂对照 必要时须用显微镜观察确认 质量保证 检测后: 核对无误后发报告 标本需4℃保存1周,以备复查 Rh血型系统的临床意义 1.Rh血型与输血 Rh+血 2.Rh血型与妊娠 3.新生儿溶血的诊断 Rh-患者 抗Rh抗体 再次输入Rh+血 溶血 四.交叉配血 目的: 发现ABO血型的不规则抗体 发现ABO血型以外的配血不合 防止因错误定型所致的输血事故 交叉配血 主侧交叉配血 用患者血清(Ps)与供血者红细胞(Dc)进行试验 次侧交叉配血 供血者血
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