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沙门氏菌鉴定检验原始记录.doc
沙门氏菌鉴定检验原始记录
记录编号:WJ- 第 1 页 共 1 页
受理编号
受检单位
样品名称
检验依据
GB4789.4-2010《食品国家安全标准 食品中卫生微生物学检验 沙门氏菌检验》
收样日期
20 年 月 日
检测仪器
HHB11-420型电热恒温培养箱(编号: 025)、3J0484型奥林巴斯显微镜(编号:032)、TN-100B型托盘式扭力天平(编号:001)
检验日期
20 年 月 日
检测项目
沙门氏菌
1.前增菌:(20 年 月 日)
取检样 加入含BPW225mL的均质杯中,以 r/min均质 min,转入锥形瓶 ℃培养 h;
2.增菌:(20 年 月 日)
轻轻摇动培养过的样品混合物,移取 1 mL,转种于 10 mL TTB 内,于 ℃培养 h。同时,另取 1 mL,转种于 10 mL SC 内,于 ℃培养 h;
3.分离:(20 年 月 日)
分别用接种环取增菌液 1 环,划线接种于一个 BS 琼脂平板和一个 XLD 琼脂平板。于 ℃分别培养 h (XLD 琼脂平板) h(BS琼脂平板),观察各个平板上生长的菌落,
BS上可疑菌落形态:※菌落颜色:□黑色有金属光泽□棕褐色□灰色□灰绿色
※周围培养基:□呈黑色或棕色□不变□
※□其它:
XLD上可疑菌落形态:□粉红色□黄色□黑色中心□全部黑色的菌落□其它:
4.生化试验:(20 年 月 日)
自选择性琼脂平板上分别挑取 个典型或可疑菌落,接种三糖铁琼脂,先在斜面划线,再于底层穿刺;接种针不要灭菌,直接接种赖氨酸脱羧酶试验培养基、蛋白胨水(供做靛基质试验)、尿素琼脂 (pH7.2)、氰化钾(KCN)培养基和营养琼脂平板,于 ℃培养 h,将已挑菌落的平板储存于室温保留24 h,以备必要时复查。反应结果见表1、表2,表3为补做试验。
表1在三糖铁琼脂和赖氨酸脱羧酶试验培养基内的反应结果
三糖铁琼脂
赖氨酸脱羧酶试验
培养基
初步判断
斜面
底层
产气
硫化氢
注:K:产碱,A:产酸;+:阳性,-:阴性;初步判断:可疑沙门氏菌属或非沙门氏菌。
表2生化反应初步鉴别表
硫化氢(H2S)
靛基质
pH7.2尿素
氰化钾(KCN)
赖氨酸脱羧酶
反应序号(判断)
注:+阳性;-阴性;+/-阳性或阴性;反应序号(判断):A1、A2、A3或非沙门氏菌。
表3补做试验(选做)
甘露醇
山梨醇
ONPG
结果判断
注:+:阳性,-:阴性;结果判断:沙门氏菌或非沙门氏菌。
5.血清学鉴定:(20 年 月 日)
玻片上划出2个约1cm×2cm的区域,挑取1环待测菌,各放1/2环于玻片上的每一区域上部,在其中一个区域下部加1滴多价菌体(O)抗血清,在另一区域下部加入1滴生理盐水,作为对照。再用无菌的接种环或针分别将两个区域内的菌落研成乳状液。将玻片倾斜摇动混合1min,并对着黑暗背景进行观察。
血清凝集结果: (+或-)
7.结果:(20 年 月 日)
沙门氏菌。
检验者: 复核者: 检毕日期:20 年 月 日
沙门氏菌
1.前增菌:(20 年 月 日)
取检样 加入含BPW225mL的均质杯中,以 r/min均质 min,转入锥形瓶 ℃培养 h;
2.增菌:(20 年 月 日)
轻轻摇动培养过的样品混合物,移取 1 mL,转种于 10 mL TTB 内,于 ℃培养 h。同时,另取 1 mL,转种于 10 mL SC 内,于 ℃培养 h;
3.分离:(20 年 月 日)
分别用接种环取增菌液 1 环,划线接种于一个 BS 琼脂平板和一个 XLD 琼脂平板。于 ℃分别培养 h (XLD 琼脂平板) h(BS琼脂平板),观察各个平板上生长的菌落,
BS上可疑菌落形态:※菌落颜色:□黑色有金属光泽□棕褐色□灰色□灰绿色
※周围培养基:□呈黑色或棕色□不变□
※□其它:
XLD上可疑菌落形态:□粉红色□黄色□黑色中心□全部黑色的菌落□其它:
4.生化试验:(20 年 月 日)
自选择性琼脂平板上分别挑取 个典型或可疑菌落,接种三糖铁琼脂,先在斜面划线,再于底层穿刺;接种针不要灭菌,直接
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