单核增生李斯特氏菌检测概述.课件.ppt

血平板 单核增生李斯特氏菌 ATCC 19117 36h，35℃培养 血平板 无害李斯特氏菌 ATCC 33090 36h，35℃培养 血平板 伊氏李斯特氏菌 ATCC 19119 24h，35℃培养 单增李斯特菌 无害李斯特菌 绵羊李斯特菌 马红球菌 金葡 协同溶血试验 单核增生李斯特氏菌检测流程(GB/T4789.30-2010) 检样 25g(或25mL)样品+LB1增菌液225mL，均质 0.1mL+10mL LB2增菌液 李斯特氏菌显色培养基 PALCAM琼脂 接种木糖、鼠李糖，36±1 ℃，24h；同时于 TSA-YE平板划线纯化，30 ±1 ℃，24h~48h 木糖-，鼠李糖+ 鉴定 结果报告 30 ±1 ℃，24h 30 ±1 ℃，18~24h 36 ±1 ℃，24h~48h * 单核增生李斯特氏菌检测概述 2010.11.27 内容 简介李斯特氏菌属 单核增生李斯特氏菌生物学特性 流行病学 致病性 实验室危害及其预防 检测程序 快速检测方法 李斯特氏菌属 李斯特氏菌属（Listeria ）普遍存在于环境中，必威体育精装版的分类学研究表明，其分为六个种： 单核增生李斯特氏菌（Listeria monocytogenes） 绵羊（伊氏）李斯特氏菌（Listeria ivanovii） 英诺克（无害）李斯特氏菌（Listeria innocua） 斯氏李斯特氏菌（Listeria seeligeri） 威氏李斯特氏菌（Listeria welshimeri） 格氏李斯特氏菌（Listeria grayi） 在李斯特氏菌属的六个种中，只有两种致病菌：单核增生李斯特氏菌和伊氏李斯特氏菌可以引起老鼠和其他动物发病。但是，其中通常只有单核增生李斯特氏菌和人类的李斯特氏菌症（listeriosis）相关。因此，李斯特氏菌中最有检测意义的是单核增生李斯特氏菌。 生物学特性---菌体形态及染色特征 革兰氏阳性； 小的、类似球形杆菌，0.4~0.5×0.5~2μm，在有些培养基中稍弯，两端钝圆，单个、成短链、细胞彼此连成V形，或成群的细胞沿长轴方向平行排列，在较老的或生长不良的培养物中，可能形成丝状； 20-25℃周生鞭毛运动，在37℃只有较少的鞭毛或1根鞭毛； 无芽孢、无荚膜。 生物学特性---培养特性 在固体培养基上，菌落初始很小，透明，边缘整齐，呈露滴状，但随着菌落的增大，变得不透明。 在5-7%的血平板上，菌落通常也不大，灰白色，刺种血平板培养后可产生窄小的β-溶血环。 在0.6%酵母浸膏胰酪大豆琼脂(TSAYE)琼脂上，用45°角入射光照射菌落，通过解剖镜垂直观察，菌落呈兰色、灰色或兰灰色。 生物学特性---生化反应 氧化酶阴性。 能发酵多种糖类，产酸不产气，如发酵葡萄糖、乳糖、水杨素、麦芽糖、鼠李糖、七叶苷、蔗糖（迟发酵）、山梨醇、海藻糖、果糖，不发酵木糖、甘露醇、肌醇、阿拉伯糖、侧金盏花醇、棉子糖、卫矛醇和纤维二糖。 不利用枸橼酸盐，40%胆汁不溶解，吲哚、硫化氢、尿素、明胶液化、硝酸盐还原、赖氨酸、鸟氨酸均阴性，VP、甲基红试验和精氨酸水解阳性。 生物学特性---血清型 根据菌体（O）抗原和鞭毛(H)抗原，将单增李氏菌分成13个血清型，分别是1/2a、1/2b、1/2c、3a、3b、3c、4a、4b、4ab、4c、4d、4e 和“7”。 致病菌株的血清型一般为1/2b、1/2c、3a、3b、3c、4a、1/2a和4b,后两型尤多。 生物学特性---抵抗力 该菌对理化因素抵抗力较强，在土壤、粪便、青储饲料和食品中能长期存活； 对碱和盐抵抗力强，60-70℃经5-20min可杀死，70%酒精5min、2.5%石炭酸、2.5%氢氧化钠、2.5%福尔马林20min 可杀死此菌； 湿热灭菌（121℃，至少15min）和干热灭菌（160-170℃，至少1hr）可杀灭该菌，对紫外线和γ射线敏感； 该菌对青霉素、氨苄青霉素、四环素（已产生抗性）、氨基糖苷类、氯霉素均敏感。 流行病学 分布：广泛存在于自然界中，土壤、地表水、污水、废水、青储饲料、动植物及其食品中均有该菌存在，所以动物很容易食入该菌，并通过口腔-粪便的途径进行传播 寄主范围：哺乳动物、鸟类、鱼类、甲壳类和昆虫 流行病学 据报道，有1-10%的人类肠道中存在单核增生李斯特氏菌，4-8%的水产品、5-10%的奶及其产品、30%以上的肉制品及15%以上的家禽均被该菌污染。 相关食品：鲜奶、巴氏消毒奶、奶酪（尤其是软奶酪）、冰激凌、生的蔬菜、发酵过的生肉制作的香肠、生的和加工过的禽肉、各种生的肉类、生的和烟熏的鱼肉。约有85-90%的病例是由被污染的食品引起