《抗衰老》课件.ppt

延缓衰老的功能食品的开发 衰老学说(300多种学说) 衰老遗传学说（程序衰老学说） 体细胞突变学说 蛋白质合成的差错灾难学说 脂褐素累积的残渣学说 内分泌功能减退学说 免疫功能下降学说 交联学说 自由基学说（由于自由基学说能比较清楚地解释机衰老过程中出现的种种症状，如老年斑、皱纹及免疫力下降等，因此倍受关注，已为人们所普遍接受。） …… 自由基此起机体衰老的主要机制 生命大分子的交联聚合和脂褐素的累积 脂褐素（Lipofuscin）是丙二醛与蛋白质等生命大分子的交联聚合产物，由于它不溶于水故不易被排除，这样就在细胞内大量堆积，其颗粒呈直径为1－5μm的圆形或椭圆形、颗粒大小会年龄增加而增大。 器官组织细胞的破坏与减少 免疫功能的降低 自由基清除剂（Scavenger） 超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,简称SOD） 超氧化物歧化酶的生理功能 清除机体代谢过程中所产生过量的超氧阴离子自由基，延缓由于自由基侵害而出现的衰老现象，如延缓皮肤衰老和脂褐素沉淀的出现。 提高人体对那由于自由基侵害而诱发疾病的抵抗力，包括肿瘤、炎症、肺气肿、白内障和自身免疫病等。 提高人体对自由基外界诱发因子的的抵抗力，如烟雾、辐射、有毒化学品和有毒医药品等，增强机体对外界环境的适应力。 减轻肿瘤患者在进行化疗、放疗时的疼痛及严重的副作用，如骨髓损伤或白细胞减少等。 消除机体疲劳，增强对超负荷大运动量的适应力。 富含SOD功能性食品的开发 利用大蒜细胞培养生产富含SOD的功能性食品 植物细胞培养技术 可以不受环境因素如气候、季节、土壤和病虫害的影响，能在地球上任何地方、任何时候生产，培养物能达到土壤栽培从未见过的整齐程度 可实现工业化连续生产，无需占用耕地，培养物生长迅速生产周期短，能在人工控制条件下采取措施提高产品和质量 任何新发现的种类都能进行细胞培养，缩短了繁殖与引种栽时间。对于那些含有有毒目标物的植物还能防止素物向自然界的扩散 大蒜愈伤组织的诱导形成及培养 先将大蒜放在8℃的低温环境中贮藏1个月，以打破其休眠期，去保护叶后用无菌水冲洗蒜瓣，再在无菌条件下用70％乙醇漂洗15-30s，置于0.1%的升汞溶液中消毒8min，取出经无菌水冲洗三遍，将蒜瓣切成0.5×0.3×0.2cm3带表皮的25℃，光照强度6000lux，每天循环光照12h，过20天左右移植于盛有愈伤组织增殖培养基的三角瓶中，在相同条件下培养20天。如此重复移植培养4-5次。 愈伤组织的诱导培养基以3％蔗糖为碳源，加0.8%琼脂，pH值为5.8。添加2ppm的2，4-二氯苯氧乙酸（植物细胞生长素）和0.1ppm的6-糖基氨基嘌呤（植物细胞分裂素）对诱导大蒜愈伤组织的形成有明显的促进作用。生长素能刺激细胞分裂，其作用机理是消除DNA复制进的抑制物，从基因水平上影响细胞分裂。 增殖培养基与诱导培养基一样，只是新添加了0.02%的酪蛋白水解物。对愈伤细胞第5次增殖5次增殖培养的跟踪表明，在培养前期大蒜细胞生长旺盛，呼吸激烈，胞内合成与积累SOD的能力也随之加强。随着时间的推移，胞内SOD急骤增加，至15天时SOD的比活力达到天然大蒜的1.5倍。但细胞增殖速率的最大值是在对数生长末期（约培养20天）才出现，此时胞内SOD的积累也达到高峰期。 大蒜细胞的悬浮培养和深层发酵 将处于对数生长期（约培养15天）的大蒜愈伤组织接种于悬浮培养基中进行液体培养，培养温度为25-30℃，pH值在5-6范围内，以28℃、pH5.8为好。经过7天的培养后，单细胞和部分小细胞团从结构松散的愈伤组织上脱落下来，由此获得的单细胞作为悬浮培养种子进行液体悬浮扩大培养或深层发酵。最初的大蒜细胞形态大小不一，经3-4次移种培养后，细胞趋于整齐一致，以圆形或椭圆形为主。可以此为种子液进行深层发酵扩大培养。 在大蒜细胞的液体扩大培养中，碳源的选择很是重要的，可选用的碳源包括蔗糖、葡萄糖、果糖、半乳糖、蜂蜜、乳糖及淀粉水解物等，其中以蔗糖和葡萄糖和产效果较好。糖类既是碳源又是培养液的渗透压调节剂，其浓度的变化会影响到细胞的生长和代谢物的产生。因此，糖类的浓度有个适宜范围，如蔗糖的范围为1.5%-4.5%（最佳值为3％）。小于1.5%，则因碳源不足，对数生长期较短；大于4.5%，则会抑制细胞的生长。 氮源对植物细胞的生长和代谢物的积累起关键作用，常见的有NO-3（如KNO3）和NH4＋（如NH4NO3）两种。对大蒜细胞培养来说，NH4NO3能刺激细胞的生长但不利于SOD的积累