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第一章-环境监测中的微生物学方法-精选版.ppt
第一章 环境监测中的微生物学方法 当环境受到污染后,环境的 物理性质 化学性质 生物学特性 如: 重金属离子、NO3- 浓度增加; 水体污染变质,水生生物种类减少,甚至灭绝; 发生变化 * 如何监测? 化学方法:快速、定性定量反映污染物浓度,但为瞬时值; 生物学方法:利用生物种类、数量的变化,生物学特性的改变来监测污染物对环境的影响。 可监测到污染物对环境的综合影响,但不易精确反映污染物的性质、浓度和数量。 * 一、空气微生物来源 空气并非微生物的繁殖场所,空气中缺乏水分和营养,紫外线的照射对微生物也有致死作用。 土壤中飞扬起来的灰尘; 水面吹起的水雾、人和动物体表干燥脱落的物质,微生物附着于这些物质的微粒上随气流传播。 第一节 空气的卫生学检验 * 微生物产生的孢子本身也可以飘浮到空气中,形成 “气溶胶”,借风力传播。 空气中的微生物中,真菌的孢子数量最多,细菌较少。而且藻类、酵母菌、病毒都会存在于空气中 。 * 二、空气微生物的卫生标准 目前,还无统一的关于空气的卫生学指标,一般以室内1m3 空气中细菌总数为50~1,000个以上作为空气污染的指标。 * 病原菌在空气中一般很易死亡,但结核菌、白喉杆菌、葡萄球菌、链球菌、肺炎双球菌、炭疽杆菌、流感病毒和脊髓灰质炎病毒等,也可以在空气中存活一段时间。 尘埃多的地方,如畜舍、公共场所、医院、城市街道的空气中,微生物数量较多。高山、海洋、森林、积雪的山脉和高纬度地带的空气中,微生物较少。 * 场所 畜舍 宿舍 城市街道 市区公园 海洋上空 北纬80o 微生物 (1~2)?106 2×104 5×103 200 1~2 0 表2-1 不同场所上空微生物的数量(个/m3 ) 表2-2 以细菌总数评价空气的卫生标准(个/m3 ) 清洁程度 细菌总数 最清洁的空气(有空调) 1~2 清洁空气 30 普通空气 31~125 临界环境 ~150 轻度污染 300 严重污染 301 * 三、空气的微生物监测 通常采用营养琼脂平板计数法。 我国检测空气微生物所用的培养皿直径为d90mm,有用d100mm的。 评价空气的清洁程度,需要测定空气中的微生物数量和空气污染微生物。测定的细菌指标有细菌总数和绿色链球菌,在必要时则测病原微生物。 * (一)空气微生物的测定方法 1.固体法 固体法有平皿落菌法(沉降—平板法)、撞击法(有缝隙采样器、筛板采样器、针孔采样器)和过滤法。 (1)平皿落菌法:将营养琼脂培养基融化倒人d90mm无菌平皿中制成平板。将它放在待测点(通常设5个测点),打开皿盖暴露于空气5~10min,以待空气微生物降落在平板表面上,盖好皿盖,置于培养箱中培养48h后取出计菌落数,即为落菌数。 * 可通过前苏联奥梅梁斯基公式换算出浮游细菌数。 奥氏认为:5 min内落在面积100mm2营养琼脂平板上的细菌数和10L空气中所含的细菌数相同。 奥氏公式: 式中:C—空气细菌数; A——捕集面积,cm2 ; t ——暴露时间,min; N——菌落数,个。 5 t 100 A 1000 10 × N × × C = * 简化后的奥氏公式: 经测定发现,用奥式公式计算的浮游细菌数比实测的浮游细菌少。 此公式没有考虑尘埃粒子大小、数量、气流情况、人员密度和活动情况。 C = 1000×50N A×t * (2)撞击法: 以缝隙采样器为例,用吸风机或真空泵将含菌空气以一定流速穿过狭缝(狭缝宽有0.15 mm、0.33 mm和1 mm三种)而被抽吸到营养琼脂培养基平板上。狭缝长度为平皿的半径,平板与缝的间隙有2mm,平板以一定的转速(1 r/min、5-60r/min、60r/min)旋转。 * 通常平板转动一周,取出置于37℃恒温箱中培养48h,根据空气中微生物的密度可调节平板转动的速度。采集含菌高的空气样品时,平板转动的速度要比含菌量低的空气样品的转速快。根据取样时间和空气流量算出单位空气中的含菌量。采样器的规格各国不一,可按说明书操作。 * 撞击法检测空气中微生物数量 培养前 培养后 * * 2 液体法 液体法用于测定空气中的浮游微生物,主要是浮游细菌。该法将一定体积的含菌空气通入无菌蒸馏水或无菌液体培养基中,依靠气流的洗涤和冲击使微生物均匀分布在介质中,然后取一定量的菌液涂布于营养琼脂平板上,或取一定量的菌液于无菌培养皿中,倒入15-18ml融化(45℃)的营养琼脂培养基,混匀,待冷凝制成平板,置于37℃恒温箱中培养48h,取出计菌落数。 * * 再以菌液体积和通入的空气量计算出单位体积空气中的细菌数。 例如:将10m3含菌空气通入100m
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