临床PCR检验室内质控2017版-李金明.pptVIP

质控图 Levey-Jennings质控图基本的统计学含义 稳定条件下，在20个IQC结果中不应有多于1个结果超过2SD（95.5%可信限）限度；在1000个测定结果中超过3SD（99.7%可信限）的结果不多于3个。 如以±3s为失控限，假失控的概率为0.3%。 “即刻法”质控方法 “即刻法”质控方法的实质是一种统计学方法，即Grubs异常值取舍法 ； 只要有3个以上的数据即可决定是否有异常值的存在。 “假阳性”的统计学室内质控方法 基于日常检验的阳性率比值(呈正态分布) 直接概率计算方法（不呈正态分布） 基于日常检验的阳性率比值 半Levey-Jennings质控图法 质控规则 当阴性质控样本为阳性时,不管阳性率测定比值为何，均为失控，所有阳性标本须重新测定，并增加一倍阴性质控样本。 如果阴性质控样本为阴性，某次测定阳性比值超出+3SD,则为失控,为1+3S规则。本次结果阴性结果根据阳性质控样本的情况,决定是否可以发出,所有阳性样本结果不能发出，需查找出现阳性率增高的原因，并在增加一倍阴性质控样本的情况下重新检测。 可能的几种失控表现 曲线向上漂移：提示出现污染，污染可能是由于某一天操作上的失误导致实验室被污染如标本泄漏，产物泄漏，试剂被污染等 向上的趋势性变化：可能存在累积性的产物污染，实验室扩增产物逐渐累积，从而使病人结果的阳性率逐渐增高。此时实验室需要进行彻底清洁。 直接概率计算法 按统计学规律，一个事件发生的概率小于5%被称为小概率事件，即发生的可能性很小。 当一个小概率事件发生时，则可能有误差存在，有必要对其发生的原因进行分析。 对每天的日常病人结果中阳性率出现的概率进行计算，如果这种结果出现的概率小于5%时，则可判为失控。 根据二项式分布的概率计算 在一个实验室中某检测项目结果的阳性率为p,计算在n个血液样本中有k个阳性结果的概率。根据二项式分布的概率计算公式如下： P(X=k)=n!/[k!(n-k)!]pk(1-p)n-k (1) 其中n为当次实验检测标本数，k为阳性个数，p为阳性率。 P(X=k)?5%为失控。此时，阴性标本可以发出报告，所有阳性标本在查清原因后重做。 根据二项式分布的概率计算 如果一个实验室检测HBV DNA，平常病人结果的阳性率为10%，即p=0.1, 在某一次检测25个样本出现6个阳性结果，19个阴性结果，则检测过程中是存在污染的可能性可通过下述方法计算。即计算在25个样本中出现6个或6个以上阳性结果的概率，此时的概率为1-（获得0个或1个或2个或3个或4个或多5个阳性结果的概率）即： 1-[P(0)+P(1)+P(2)+P(3)+P(4)]=1-[(1-0.1)25+25(1-0.1)240.1+300(1-0.1)230.12+2300(1-0.1)220.13+12650(1-0.1)210.14+53130(1-0.1)200.15]=0.0334 则在这个实验室一次检测25个标本获得6个或6个以上阳性结果的概率为3.34%，小于5%，属于小概率事件，即发生的可能性很小，可能有污染所致假阳性结果的可能。 根据泊松分布的概率计算 在血液筛查检测中，许多实验室或检测项目如HCV RNA 、CT、结核杆菌、淋球菌的阳性结果率均较低，这时虽然可以使用公式（1）计算概率，但如果标本量很大，使用泊松分布来估计二项式分布是一种更为简便的方法。。根据泊松分布，可使用下式计算概率： P(X=k) =(np)ke-np/k! (2) P(X=k)?5%为失控。此时，阴性标本可以发出报告，所有阳性标本在查清原因后重做。 根据泊松分布的概率计算 一个实验室中，某项目每次检测结果的阳性率约为2%，则在100个样本中出现8个阳性结果的概率。 根据泊松分布，可使用公式（2）计算概率，此时n=100,p=0.02,k=8, np=2代入公式（2）计算得 P(X=10) =28e-2/8!=0.0009。 标本间交叉污染的概率计算 如果所有阳性结果的出现是连续性的，则可能存在标本间的交叉污染，即阳性样本污染了它邻近的阴性样本，这种情况的概率计算公式如下： P=(n-r+1)/[n!/r!(n-r)!] （3） 其中n为当次实验检测标本数，r为连续出现阳性的个数。 当某次实际测定标本连续阳性的概率大于所计算的概率，则判为失控。阴性标本结果可以发出，阳性标本要考虑标本间交叉污染的问题。 标本间交叉污染的概率计算 如在一次检测100个标本的HBV DNA检测中，所有两个阳性结果连续出现的概率为： P=(100-2+1)/[100!/2!(100-2)!]=99/4950=0.02 概率为2.0%