木薯MeTPS9基因克隆及表达特性分析-生物技术通报.PDF

生物技术通报 ·研究报告· BIOTECHNOLOGY BULLETIN ( ) 2017, 33 11 :84-91 木薯 MeTPS9 基因克隆及表达特性分析 丁泽红  付莉莉  铁韦韦  颜彦  胡伟 （中国热带农业科学院热带生物技术研究所，海口 571101） 摘 要 ： 旨在揭示木薯MeTPS9 基因在干旱、低温、遮荫等非生物胁迫应答中的作用。用RT-PCR 的方法从木薯叶片中克隆 MeTPS9 基因 （GenBank登录号 ：MF276889），用MEGA 软件构建系统进化树，用DnaSP 软件分析基因结构变异，用PlantCARE 分 析启动子元件，用荧光定量PCR 技术分析MeTPS9 在不同组织中以及响应不同非生物胁迫的表达特性。结果显示，从木薯中克隆 了一个TPS 基因MeTPS9 。该基因具有2 598 bp 的开放阅读框，编码865 个氨基酸，含有TPS 家族保守结构域。 系统进化树分析 表明， 与荠菜花和拟南芥中同源基因的亲缘关系较近，序列相似性分别为76.2% 和75.6%。基因结构变异发现，木薯野生 MeTPS9 种和栽培种之间共有66 个突变位点，其中11 个为错义突变。启动子元件分析表明， 含有干旱相关元件MBS、低温相关元 MeTPS9 件LTR、热胁迫相关元件HSE、 以及ABA 相关元件ABRE。 实时荧光定量PCR 分析表明， 的表达量在须根中最高，在叶 MeTPS9 片中最低。而且， 基因的表达能被干旱、低温、和遮荫处理显著诱导。 在转录水平对木薯干旱、低温、和遮荫胁 MeTPS9 MeTPS9 迫起调控作用，可作为候选基因进一步研究其在木薯抗逆中的作用。 关键词 ： 木薯 ； ；海藻糖合成酶；结构变异 ；表达分析 ；非生物胁迫 MeTPS9 DOI ：10.13560/ki.biotech.bull.1985.2017-0416 Clone and Expression Characteristics of MeTPS9 Gene in Cassava DING Ze-hong FU Li-li TIE Wei-wei YAN Yan HU Wei （Institute of Tropical Bioscience and Biotechnology ，Chinese Academy of Tropical Agricultural Science ，Haikou 571101 ） Abstract: This work aims to reveal the function of MeTPS9 gene in abiotic stresses（e.g.，drought，cold，and shade）in cassava. RT-PCR method was applied to