微生物发酵液-关指标测定.pptx

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微生物发酵液-关指标测定

发酵液相关指标测定;目录;一、DO(溶解氧);一、DO(溶解氧);一、DO(溶解氧);一、DO(溶解氧);二、COD(化学需氧量);方法:重铬酸钾法 原理:在强酸性溶液中,用一定量的重铬酸钾氧化水样中还原性物质,过量的重铬酸钾以试亚铁灵作指示剂,用硫酸亚铁铵溶液回滴。根据硫酸亚铁铵的用量算出水样中还原性物质消耗氧的量。 ;仪器: ①回流装置 ②加热装置 ③酸式滴定管:25mL或50mL;试剂: ①K2Cr2O7标准溶液:1/6 K2Cr2O7=0.2500 mol/L。 ②试亚铁灵指示液。 ③硫酸亚铁铵标准溶液:(NH4)2Fe(SO4)2·6H2O≈0.1mg/L。 ④硫酸-硫酸银溶液:500mL浓硫酸中加入5g硫酸银。 ⑤硫酸汞:结晶或粉末。;步骤: 1)20.00mL混合均匀的水样置250mL磨口回流锥形瓶中,加入10.00mL K2Cr2O7标准溶液及沸石,连接磨口回流冷凝管,从冷凝管上口慢慢加入30mL硫酸-硫酸银溶液,混匀,加热回流2h。 2)冷却后,用90mL水从上部慢慢冲洗冷凝管壁,取下锥形瓶。液体总体积不得少于140mL。 3)溶液再度冷却,加3滴试亚铁灵指示液,用 ( NH4)2Fe(SO4)2标准溶液滴定。 4)以20.00mL重蒸馏水作空白试验。;计算公式: 式中: C——(NH4)2Fe(SO4)2标准溶液的浓度(mol/L); V0——滴定空白时硫酸亚铁铵标准溶液用量(mL); V1——滴定水样时硫酸亚铁铵标准溶液的用量(mL); V——水样的体积(mL); 8——氧(1/2O)摩尔质量(g/mol)。;三、BOD5(五日生化需氧量) ;方法:稀释接种法 原理: 通常情况下是指水样充满完全密闭的溶解氧瓶中,在(20±1)℃的暗处培养 5d±4h 或(2+5)d±4h(先在 0~4℃的暗处培养 2d,接着在(20±1)℃的暗处培养 5d,即培养(2+5)d),分别测定培养前后水样中溶解氧的质量浓度,由培养前后溶解氧的质量浓度之差,计算每升样品消耗的溶解氧量,以 BOD5 形式表示。 ;仪器: ①恒温培养箱(20℃±1℃)。 ②5~20L细口玻璃瓶。 ③1000~2000mL量筒。 ④玻璃搅拌棒:棒的长度应比所用量筒高度长200mm。在棒的底端固定一个直径比量筒底小、并带有几个小孔的硬橡胶板。 ⑤溶解氧瓶:250~300mL之间,带有磨口玻璃塞并具有供水封用的钟形口。 ⑥虹吸管:供分取水样和添加稀释水用。;试剂: 1)磷酸??缓冲溶液:PH应为7.2。 2)硫酸镁溶液 3)氯化钙溶液 4)氯化铁溶液 5)盐酸溶液:0.5mol/L 6)NaOH溶液:0.5mol/L 7)亚硫酸钠溶液:1/2Na2SO3=0.025 mol/L,此溶液不稳定,需每天配制。 8)葡萄糖-谷氨酸标准溶液:此标准溶液临用前配制。 9)稀释水。 10)接种液:可选用城市污水、表层土壤浸出液、含城市污水的 河水或湖水、污水处理厂的出水。 11)接种稀释水:PH应为7.2。接种稀释水配制后应立即使用。;步骤: 1)水样的预处理 2)①不经稀释水样的测定: 针对于溶解氧含量高、有机物含量较少的地表水,直接以虹吸法将约20℃的混匀水样转移入两个溶解氧瓶内。以同样的操作使两个溶解氧瓶充满水样后溢出少许,加塞。瓶内不应留有气泡。其中一瓶随即测定溶解氧,另一瓶水封后,在20±1℃培养箱内培养5d。五昼夜后测定剩余的溶解氧。 ②需经稀释水样的测定: 先确定稀释倍数,再进行稀释。其余步骤与上述一般稀释法相同。;计算公式: 1)不经稀释直接培养的水样 式中: C1——水样在培养前的溶解氧浓度(mol/L); C2——水样经5d培养后,剩余溶解氧浓度(mol/L)。;2)经稀释后培养的水样 式中: B1——稀释水(或接种稀释水)在培养前的溶解氧(mol/L); B2——稀释水(或接种稀释水)在培养后的溶解氧(mol/L); f1——稀释水(或接种稀释水)在培养液中所占的比例; f2——水样在培养液中所占的比例。;四、氨氮;仪器:①分光光度计 ②PH计 试剂: ①纳氏试剂 ②酒石酸钾钠溶液(KNaC4H4O6) ③铵标准贮备溶液:此溶液每毫升含 1.00mg氨氮 ④铵标准使用溶液:此溶液每毫升含0.010mg氨氮;步骤: 1)水样预处理 2)标准曲线的绘制 3)水样的测定 取适量经絮凝沉淀预处理后的水样,加入50ml比色管 中,稀释至标线,加1.0mL酒石酸钾溶液。以下同标准 曲线的绘制。 4)空白试验:以无氨水代替水样,做全程序空白测定。;计算公式: 氨氮(N,mg/L) 式中: m——由标准曲线查得

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