养殖刺参腐皮综合征2种致病菌间接荧光抗体快速检测-中国水产科学.PDF

第17卷第2期 中国水产科学 Vol.17 No.2 2 0 1 0 年 3 月 Journal of Fishery Sciences of China March 2010 养殖刺参腐皮综合征2 种致病菌间接荧光抗体快速检测方法 1 2 1 1 1 王印庚 ， 谢建军 ，荣小军 ，廖梅杰 ，张正 （1. 中国水产科学研究院 黄海水产研究所，青岛市海水鱼类种子工程与生物技术重点实验室，山东 青岛 266071；2. 浙江省海 洋水产研究所，浙江 舟山 316100） 摘要：以养殖刺参（ ）腐皮综合征的 2 种致病菌：灿烂弧菌（ ）和假交替单胞菌 Apostichopus japonicus Vibrio splendidus （ ）为抗原，分别制备兔抗血清。以载玻片为介质，建立了 2 种病原菌的间接荧光抗体检测 Pseudoalteromonas nigrifaciens 技术（IFAT）。交叉反应、阻断试验和吸收试验结果均表明本方法特异性强。对人工感染实验中的养殖水体及发病刺参 4 溃烂组织检测，可以检出水体和患病刺参溃烂组织中的相应病原菌，病原菌被染成明亮的黄绿色，检测灵敏度 2.4×10 cell/mL。冰冻切片检测结果显示，在刺参肿胀嘴部与溃烂肌肉处有大量染成黄绿色的细菌颗粒。结果表明：采用 IFAT 可以对刺参腐皮综合征 2 种致病菌进行准确快速的检测。该方法的建立对刺参腐皮综合征的流行病学调查及快速诊断 具有重要意义。[ 中国水产科学，2010，17（2）：329-336] 关键词：刺参；腐皮综合征；灿烂弧菌；假交替单胞菌；间接荧光抗体检测（IFAT） 中图分类号：S94　　　　　　　文献标识码：A　　　　　　 文章编号：1005-8737- （2010）02-0329-08 21 世纪初，刺参（ ）养殖在 （ ）2 种菌均为该病的 Apostichopus japonicus Pseudoalteromonas nigrifaciens 中国北方沿海蓬勃兴起，并迅速发展成为中国最重 致病原（图版Ⅰ-B、C）。 要的海水养殖种类之一。2008 年中国养殖刺参总 目前应用于水产动物疾病快速检测的方法主 [ ] 面积达 64 386 hm2 ，年总产量 77 517 t 1 ，产生了巨 要有：细菌自动鉴定系统、酶联免疫检测，免疫荧光 [ ] [ ]