两种天然产物对B16F10细胞增殖及黑色素合成抑制-生物技术通报.PDF

生物技术通报 ·研究报告· BIOTECHNOLOGY BULLETIN ( ) 2017, 33 8 :199-205 两种天然产物对 B16F10 细胞增殖及黑色素合成抑制 机理研究 程杏安  张淑明  周晓武  吴波  林贤伟  秦湘静  黄素青   1 1 1 1 1 2 1 刘展眉1  蒋旭红1 （1. 仲恺农业工程学院天然产物化学研究所，广州  510225；2. 中国科学院南海海洋研究所，广州  510301） 摘 要 ： 旨在研究10- 羟基喜树碱 （10-hydroxycamptothecin，HCPT）和白藜芦醇 （Resveratrol，Res）对体外培养的小鼠恶 性黑色素瘤B16F10细胞的增殖及黑色素合成抑制机理。利用MTT法、显微观察、L-Dopa氧化法、NaOH裂解法分析不同浓度 HCPT和Res对细胞增殖、细胞形态、酪氨酸酶活性及黑色素合成含量的影响。荧光半定量PCR方法 （Semi-RT-PCR）分析该化合 物对黑色素合成关键因子酪氨酸酶 （TYR）和小眼相关转录因子 （MITF）基因表达的影响。结果表明HCPT（40、80、120、160 和200 μmol/L）和Res（80、120、160和200 μmol/L）能够通过诱导细胞凋亡抑制B16F10细胞的增殖，同时对酪氨酸酶活性和细 胞黑色素生成具有明显抑制作用 （0.05），且呈现浓度依赖性。另外，不同浓度的HCPT以及高浓度Res（120和160 μmol/L）能 P 够显著下调B16F10细胞TYR 和MITF 基因的mRNA水平。HCPT和Res可能通过诱导细胞凋亡抑制B16F10细胞的增殖，同时通 过下调 基因转录，抑制  mRNA 的表达及TYR酶活性，进而抑制细胞黑色素的生成。 MITF TYR 关键词 ： 10- 羟基喜树碱 ；白藜芦醇；酪氨酸酶 ；黑色素；小眼相关转录因子 DOI：10.13560/ki.biotech.bull.1985.2017-0122 Study on Inhibition Mechanism of Melanogenesis and Melanin Synthesis of B16F10 Cell Induced by Two Natural Products CHENG Xing-an  ZHANG Shu-ming  ZHOU Xiao-wu  WU Bo  LIN Xian-wei  QIN Xiang-jing   1 1 1 1 1 2 HUANG Su-qing  LIU Zhan-mei  JIANG Xu-hong1 1 1 （1. Institute of Natural Product Chemistry ，Zhongkai University of Agriculture and Engineering ，Guangzhou 510225 ；2. South China Sea Institute of Oceanology ，Chinese Academy of Sciences ，Guangzhou 510301 ） Abstract: This study aims to clarify the inhibition mechanism of proliferation and melanin synthesis of B16F10 cell induced by 10-hydr