沉默miR345表达联合氟尿嘧啶对胃癌细胞MGC803增殖的-新医学.PDF

新医学２０１８年７月第４９卷第７期 ４９３ ·研究论著 · 沉默ｍｉＲ３４５表达联合氟尿嘧啶对胃癌细胞 ＭＧＣ８０３增殖的影响 马俊　李博　王丽萍　许鸣 　　 【摘要】　目的　观察沉默微小ＲＮＡ３４５（ｍｉＲ３４５）表达联合氟尿嘧啶对胃癌细胞ＭＧＣ８０３增殖 侵袭能力的影响。方法　采用脂质体介导转染ｍｉＲ３４５反义序列至胃癌细胞 ＭＧＣ８０３以沉默ｍｉＲ３４５ 表达。ＭＴＴ检测沉默ｍｉＲ３４５表达联合氟尿嘧啶对胃癌细胞ＭＧＣ８０３增殖的抑制作用，确定抑制作用 最明显时的氟尿嘧啶浓度，采用Ｔｒａｎｓｗｅｌｌｍａｔｒｉｇｅｌ体外侵袭试验检测胃癌细胞 ＭＧＣ８０３的侵袭能力。 结果　成功转染ｍｉＲ３４５反应序列至胃癌细胞 ＭＧＣ８０３，转染后的ａｓｍｉＲ３４５组细胞ｍｉＲ３４５ｍＲＮＡ 表达水平均低于无义序列组及空白对照组（Ｐ均＜００１）。ＭＴＴ比色法显示，ＭＧＣ８０３的细胞生长抑 制率随氟尿嘧啶浓度增加而增加；沉默ｍｉＲ３４５表达和氟尿嘧啶均能抑制胃癌细胞ＭＧＣ８０３的体外增 殖，两者联合后，细胞的增殖抑制更明显；沉默ｍｉＲ３４５表达与１０、２０、４０、８０、１６０ ｇ／ｍｌ的氟尿 μ 嘧啶联用时均具有协同作用，氟尿嘧啶４０ ｇ／ｍｌ浓度时此作用最明显。Ｔｒａｎｓｗｅｌｌｍａｔｒｉｇｅｌ体外侵袭试 μ 验显示，ａｓｍｉＲ３４５组、无义序列组＋氟尿嘧啶组、空白对照组＋氟尿嘧啶组的穿膜细胞数少于空白 对照组（Ｐ均＜００５）。ａｓｍｉＲ３４５＋氟尿嘧啶组穿膜细胞数少于ａｓｍｉＲ３４５组、空白对照＋氟尿嘧啶 组（Ｐ均＜００５）。结论　沉默ｍｉＲ３４５表达联合氟尿嘧啶能增加氟尿嘧啶对ＭＧＣ８０３细胞增殖侵袭能 力的抑制作用。 　　 【关键词】　胃肿瘤；微小核糖核酸３４５；氟尿嘧啶；细胞增殖 ＥｆｆｅｃｔｏｆｍｉＲ３４５ｓｉｌｅｎｃｉｎｇｃｏｍｂｉｎｅｄｗｉｔｈ５ｆｌｕｏｒｏｕｒａｃｉｌｏｎｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｏｆｇａｓｔｒｉｃｃａｎｃｅｒｃｅｌｌｌｉｎｅ ＭＧＣ８０３　ＭａＪｕｎ，ＬｉＢｏ，ＷａｎｇＬｉｐｉｎｇ，ＸｕＭｉｎｇＤｉｇｅｓｔｉｖｅＤｅｐａｒｔｍｅｎｔ，ＦｏｓｈａｎＳｅｃｏｎｄＰｅｏｐｌｅｓＨｏｓｐｉｔａｌ， Ｆｏｓｈａｎ５２８０３１，Ｃｈｉｎａ Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇａｕｔｈｏｒ，Ｘｕｍｉｎｇ，Ｅｍａｉｌ：１７７ｘｍ＠１６３ｃｏｍ 【Ａｂｓｔｒａｃｔ】　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　ＴｏｅｖａｌｕａｔｅｔｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆｍｉＲ３４５ｓｉｌｅｎｃｉｎｇｃｏｍｂｉｎｅｄｗｉｔｈ５ｆｌｕｏｒｏｕｒａｃｉｌｏｎ ｔｈｅｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎａｎｄｉｎｖａｓｉｏｎｏｆｇａｓｔｒｉｃｃａｎｃｅｒｃｅｌｌＭＧＣ８０３ｉｎｖｉｔｒｏＭｅｔｈｏｄｓ　ＥｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｍｉＲ３４５ｉｎ ＭＧＣ８０３ｃｅｌｌｓｗａｓｓｉｌｅｎｃｅｄｂｙｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎｏｆｍｉＲ３４５ａｎｔｉｓｅｎｓｅｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓｉｎｔｏｃｅｌｌｓｔｈｒｏｕｇｈｌｉｐｏｓｏｍｅ ＭＴＴｃｏｌｏｒｉｍｅｔｒｉｃａｓｓａｙｗａｓａｄｏｐｔｅｄｔｏｅｖａｌｕａｔｅｔｈｅｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙｅｆｆｅｃｔｏｆｍｉＲ３４５ｓｉｌｅｎｃｉｎｇｃｏｍｂｉｎｅｄｗｉｔｈ５ｆｌｕ ｏｒｏｕｒａｃｉｌｕｐｏｎｔｈｅｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｏｆＭＧＣ８０３ｃｅｌｌｓａｎｄｄｅｔｅｒｍｉｎｅｔｈｅｏｐｔｉｍａｌｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｆ５ｆｌｕｏｒｏｕｒａｃｉｌＴｒ ａｎｓｗｅｌｌｍａｔｒｉｇｅｌａｓｓａｙｗａｓｐｅｒｆｏｒｍｅｄｔｏｄｅｔｅｃｔｔｈｅｉｎｖａｓｉｏｎａｂｉｌｉｔｙｏｆＭＧＣ８０３ｃｅｌｌｓＲｅｓｕｌｔｓ　ＴｈｅｍｉＲ３４５ ａｎｔｉｓｅｎｓｅｓｅｑｕｅｎｃｅｗａｓｓｕｃｃｅｓｓｆｕｌｌｙｔｒａｎｓｆｅｃｔｅｄｉｎｔｏｔｈｅＭＧＣ８０３ｃｅｌｌｓＴｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｌｅｖｅｌｏｆｍｉＲ３４５ｍＲＮＡ ｉｎｔｈｅａｓｍｉＲ３４５ｇｒｏｕｐｗａｓｓｉｇｎｉｆｉｃ