消减杂交筛选2BS细胞衰老过程中差异表达基因-北京大学医学部.PDF

ISSN 中国生物化学与分子生物学报 2004 年 6 月 CN 　113870Q Chinese Journal of Biochemistry and Molecular Biology 20 (3) :311～318 消减杂交筛选 2BS 细胞衰老过程中差异表达基因 赵 　亮 , 　童坦君 , 　张宗玉 (北京大学医学部生物化学与分子生物学系 ,北京　100083) 摘要 　细胞的复制性衰老最终导致不可逆的 G 期阻滞 ,研究此过程中差异表达基因对于阐明衰老 1 发生机制有重要意义. 分别构建年轻和衰老 2BS 细胞高表达基因的消减文库 ,经点杂交筛选后共得 53 个差异表达基因. 对其中部分基因的Virtual Northern 印迹分析证实差异表达确实存在. 选择 Y114 和 S111 片段 , 以Northern 印迹分析确证其表达变化; 并通过对新生儿和老年人白细胞中二者的表 达分析 ,显示二者在体内也存在与体外衰老过程相一致的随增龄表达变化. 结果在一定程度上体现 了2BS 细胞衰老过程中基因表达谱的变化 ; 首次报道了 TSSC3 (tumor suppressing subtransferable ) ( ) candidate 3 、hnRNP K heterogeneous nuclear ribonucleoprotein K 等基因在成纤维细胞衰老时发生差 异表达 ;通过对 Y114 和 S111 在体内衰老时的表达分析 ,显示体内和体外衰老有一定的相关性. 关键词 　复制性衰老 , 2BS , 消减杂交 , 差异表达基因 中图分类号 　Q75 ,Q255 Screening for Differentially Expressed Genes upon 2BS Fibroblasts Senescence by Subtractive Hybridization ZHAO Liang , TONG Tanjun , ZHANG Zongyu ( Department of Biochemistry Molecular Biology , Peking University Health Science Center , Beijing 　100083 , China) Abstract 　Replicative senescence causes an irreversible G arrest finally. The study of differentially expressed 1 genes upon senescence is important to clarify the mechanisms underlying the process. Construction and