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人结核菌糖脂TBGL酶联免疫分析ELISA试剂盒使用说明书
人结核菌糖脂(TBGL)酶联免疫分析(ELISA)
试剂盒使用说明书
本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关
液体样本中结核菌糖脂(TBGL)的含量。
实验原理:
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中 人结核菌糖脂(TBGL)水平。用纯化的人结核菌
糖脂(TBGL)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中加入结核菌糖脂(TBGL),
再与HRP标记的结核菌糖脂(TBGL)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底
洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最
终的黄色。颜色的深浅和样品中的结核菌糖脂(TBGL)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下
测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人结核菌糖脂(TBGL)的浓度。
试剂盒组成:
试剂盒组成 48孔配置 96孔配置 保存
说明书 1份 1份
封板膜 2片(48) 2片(96)
密封袋 1个 1个
酶标包被板 1×48 1×96 2-8℃保存
标准品:270ng/L 0.5ml×1瓶 0.5ml×1瓶 2-8℃保存
标准品稀释液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶 2-8℃保存
酶标试剂 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存
样品稀释液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存
显色剂A液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存
显色剂B液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存
终止液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存
浓缩洗涤液 (20ml×20倍)×1瓶 (20ml×30倍)×1瓶 2-8℃保存
样本处理及要求:
1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右 (2000-3000转/分)。仔细收集上
清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合 10-20分钟后,离心
20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次
离心。
3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程
中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右 (2000-3000转/
分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PB (PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞
浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分
1
钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PB ,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备
用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PB (PH7.4),用手工或匀浆器
将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分
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