企鹅珍珠贝镉金属硫蛋白的分离纯化及其多克隆抗体的制备-水产学报.PDF

第 卷第 期 水产学报 年 月 文章编号 企鹅珍珠贝镉金属硫蛋白的分离纯化及其多克隆抗体的制备 吴晓萍 廖爱琳 章超桦 廖艳 卢虹玉 杨捷 广东海洋大学食品科技学院广东 湛江 广东海洋大学现代生化中心广东 湛江 摘要 镉金属硫蛋白是水生环境中重金属镉污染的重要生物标志物对该蛋白的 研究不仅有利于免疫学检测方法的建立也为水生环境重金属污染监测技术的开发提 供理论依据 采用不同浓度 胁迫诱导企鹅珍珠贝合成通过组 织捣碎冷冻离心热处理 凝胶柱层析等方法从企鹅珍珠贝全脏器中纯化得到 紫外吸收显示在浓度为 时粗提液中的特征吸收最 大表明贝体内的含量随着胁迫浓度的增大而增加 显示纯化后的 及其二聚体分子量约为 和 采用戊二醛法将获得的与牛血清白蛋 白偶联后免疫家兔制备了兔抗企鹅珍珠贝多克隆抗血清 通过间接 法检测其抗血清效价为 经饱和硫酸铵法和 亲和层析纯化得 到分子量约为 的高纯度免疫球蛋白 免疫鉴定显示该不仅能识别 企鹅珍珠贝的还与马氏珠母贝的有明显的免疫交叉反应 关键词 企鹅珍珠贝 镉金属硫蛋白 多克隆抗体 中图分类号 文献标志码 随着工业的发展大量的重金属以多种方式 为 很容易被 等重 进入海洋由此造成水环境中的重金属含量不断 金属诱导合成研究表明水生生物体内含量 增加 重金属镉是主要的海洋污染物之一由于 与水生环境中的的重金属含量成正相关能够间 水生生物对镉的富集能力极强水中的镉通过食 接反应环境的重金属污染情况因而可作为 物链富集后可在其体内达到相当高的浓度 水生环境重金属污染的生物标志物 在环境保 贝类是滤食性的底栖生物它生活在沉积物与水 护领域内被大量地研究常用的检测方法包括血 体的界面体内的重金属和一些化学物质的含量 红蛋白亲和层析法银饱和法银染法和 与周围水生环境污染程度密切相关能够真实反 检测法等 其中检测法因其操作简单快 映环境的污染状况因而成为重要的海洋污染监 速而受到众多研究者的青睐 目前对的研究主要集中在哺乳动物和 测生物 金属硫蛋白 是一类 植物上对于海洋动物如贝类的研究相对较少 广泛存在于生物体内的低分子量富含金属和半 作为一个贝类生产和消费大国在如今海洋环境 胱氨酸能被金属或其他因素诱导生成的金属结 污染日益严重的情况下研究简单快速的贝类重