利用双T2DNA载体系统获得无选择标记转基因菊花-园艺学报.PDF

园　艺 　学 　报 　2008, 35 ( 5) : 727 - 734 A cta Horticu lturae Sin ica 利用双 TD NA 载体系统获得无选择标记转基因菊 花 孙 　磊 , 张启翔 , 周 　琳 , 陆　苗 , 蔡 　明 (北京林业大学园林学院 , 国家花卉工程技术研究中心 , 北京 100083) 摘 　要 : 为获得具有无选择标记的转基因菊花 , 构建了一个双 TDNA 超级双元载体 pCAMB IA 1301 g us, 其中一个 TDNA 结构域中含有选择标记基因 hp t, 另一个 TDNA 结构域中含有 目的基因 g us, 而且两 个 TDNA 结构顺序相连 , 中间没有其他插入序列 。利用农杆菌介导转化菊花幼嫩茎尖薄层细胞 , 共获得 506个抗性植株 , 通过 PCR 和 Sou thern杂交检测表明共转化率为 384% , 对其中 17个同时整合了 hp t和 g us 基因的植株自交获得的 T 代株系进行检测 , 发现约有 158%的 T 代植株中不含选择标记基因 hp t, 结果表 1 1 明双 TDNA 载体系统能有效地用于培育无选择标记转基因植物 。 关键词 : 菊花 ; 转基因; 双 TDNA ; 共转化 ; 无选择标记 中图分类号 : S 682 1+ 1　　文献标识码 : A 　　文章编号 : 0513353X (2008) Genera ting M arkerfree Tran sgen ic Chry san them um by A g roba c ter ium M e d ia ted Tran sform a tion w ith Tw in TD NA B inary Vector s SUN L ei , ZHAN G Q ixiang , ZHOU L in , LU M iao, and CA IM ing (N a tiona l F low er E ng ineering Technology R esea rch Cen ter, Colleg e of L andscap e A rch itectu re, B eij ing F ores try Un ivers ity, B eij ing 100083, Ch ina) A b stract: In th is study, we con structed a sup er b inary vector to evaluate the poten tial of the tw in TDNA system for generating selectab le m arkerfree p rogeny p lan ts in chrysan them um p lan ts. The first TDNA of the vector, con tain s the hygrom ycin p ho sp hotran sfera se ( hp t) selectab le gene, wh ile the second TDNA , bears β ( ) the glucu ron ida se gene g us ,