926 药品微生物限度检测技术.ppt

★沙门菌 沙门菌是指一群寄生于人类和动物肠道内的革兰阴性兼性厌氧杆菌，不发酵乳糖和蔗糖，发酵葡萄糖和甘露醇。 ★沙门菌检查意义 沙门菌是肠杆菌科的重要致病菌，可随粪便或带菌者接触污染药品原辅料、制药用水、设备、半成品、成品，尤其是动物脏器为原料的药物，服用后有引起人类伤寒、副伤寒、急性肠炎即败血症等疾病的危险。 * ★沙门菌检查流程图 靛基质试验 脲酶试验 生化试验 氰化钾试验 赖氨酸脱羧酶试验 动力试验 血清学凝聚试验 有特征菌落 三糖铁琼脂培养基穿刺接种 最终结果判断 增菌培养 供试液的制备 书写检验 记录单 分离纯化 无菌落或无特征菌落 配培养基和稀释液 预增菌 营养肉汤 四硫磺酸钠亮绿培养基 ①SS琼脂 ②麦康凯琼脂 ①黑色②半透明 初步鉴别 四硫磺酸钠亮绿培养基 SS培养基 黑色菌落 麦康凯培养基 半透明菌落 三糖铁斜面 疑似菌落 赖氨酸脱羧酶培养基 紫色 半固体营养琼脂培养基 血清凝集 ★沙门菌检查结果报告 检出沙门菌 革兰阴性杆菌 三糖铁反应及生化反应符合沙门菌属反应 血清凝集试验阳性反应 ★铜绿假单胞菌 铜绿假单胞菌属于假单胞菌属，为革兰氏阴性杆菌，氧化酶阳性，能产生绿脓菌素。此外还能液化明胶，还原硝酸盐为亚硝酸盐，在42℃±1℃条件下能生长。 ★铜绿假单胞菌检查意义 铜绿假单胞菌在特殊情况下可引起皮肤化脓感染、泌尿道感染、中耳炎等。外伤及烧伤患者感染后最易引起化脓，并引起败血症。为保证消费者安全，化妆品中不得检出铜绿假单胞菌。 最终结果判断 增菌培养 供试液的制备 书写检验 记录单 分离纯化 无菌落或无特征菌落 配培养基和稀释液 革兰染色、镜检→ 氧化酶试验 绿脓菌素试验 生化试验 硝酸盐还原试验 42℃生长试验 明胶液化试验 ★铜绿假单胞菌检查流程图 胆盐乳糖培养基 十六烷三甲基溴化铵琼脂 30-35℃ 18~24h 30-35℃ 18~24h 特征菌落 灰白色、扁平、周围有水溶性蓝绿色素 十六烷三甲基溴化铵平板 胆盐乳糖培养基 黄绿色菌膜 灰白色湿润 氧化酶试验 粉红/紫红色 绿脓菌素试验 盐酸层呈粉紫色氯仿层呈蓝绿色 硝酸盐还原产气试验 N2 明胶液化试验 明胶培养基（高层） 明胶液化 ★铜绿假单胞菌检查结果报告 被检样品经增菌分离培养后，经证实为革兰氏阴性杆菌，氧化酶及绿脓菌素试验皆为阳性者，即可报告被检样品中检出铜绿假单胞菌；如绿脓菌素试验阴性而液化明胶、硝酸盐还原产气和42℃生长试验三者皆为阳性时，仍可报告被检样品中检出铜绿假单胞菌。 ★金黄色葡萄球菌 金黄色葡萄球菌为革兰氏阳性球菌，呈葡萄状排列，无芽胞，无荚膜，能分解甘露醇，血浆凝固酶阳性。 ★金黄色葡萄球菌检查意义 金黄色葡萄球菌在外界分布较广，抵抗力也较强，能引起人体局部化脏性病灶，严重时可导致败血症，因此化妆品中检验金黄色葡萄球菌有重要意义。 革兰染色、镜检→ 生化试验:血浆凝固酶试验 最终结果判断 增菌培养 供试品的处理 书写检验 记录单 分离纯化 无菌落或无特征菌落 配培养基和稀释液 30-35℃ 30-35℃ 营养肉汤培养基或亚碲酸钠肉汤 18-24h 卵黄氯化钠或甘露醇氯化钠琼脂 24-72h 特征菌落 金黄色、边缘有浑浊带 ★金黄色葡萄球菌检查流程图 卵黄氯化钠琼脂 金黄色，有乳浊圈 甘露醇发酵试验 血浆凝固酶试验 血浆凝块 液态血浆 ★金黄色葡萄球菌检查结果报告 凡在上述选择平板上有可疑菌落生长，经染色镜检，证明为革兰氏阳性葡萄球菌，血浆凝固酶试验阳性者，可报告被检样品检出金黄色葡萄球菌。 增菌培养 供试液的制备 书写检验 记录单 不出现浑浊、产气、 消化碎肉、臭气 配培养基和稀释液 其他 分离纯化 最终结果判断 革兰染色、镜检→ 生化试验：过氧化酶试验 梭菌增菌培养 含庆大霉素的哥伦比亚琼脂 厌氧35-37度，48h 有特征菌落 念珠菌显色培养基 最终结果判断 革兰染色、镜检 芽管试验 增菌培养 供试液的制备 书写检验 记录单 分离纯化 配培养基和稀释液 无菌落或无特征菌落 有特征菌落 1%聚山梨酯80-玉米培养基 3.2.8活螨检查 1．简述 螨，属于节肢动物门，蛛形纲，蜱螨目。种类繁多，分布甚广。 其生活习性各异，分为自由生活和寄生生活两种类型。在土壤、池沼、江河和湖海里，动、植物体上，贮藏食品和药品中，都可能有它们的存在。 3.2.8活螨检查 药品可因其原料、生产过程或包装、运输、贮存、销售等条件不良，受到螨的污染。 螨可蛀蚀损坏药