家畜传染病学禽病学实验指导.doc

家畜传染病学、禽病学实验指导 王川庆 刘红英 陈陆 河南农业大学牧医工程学院 二零零四年二月一日 目录 第一部分 基本技术 一、消毒 二、免疫接种 三、剖检技术及病变检查要点 四、细菌分离、培养技术 五、药敏试验 六、病毒分离培养技术 七、鸡胚接种技术 八、动物试验技术 九、病原体的鉴定方法 第二部分 传染病实验室诊断技术 一、鸡新城疫的诊断及免疫监测技术 二、减蛋综合征的诊断及抗体检测 三、马立克氏病琼扩试验 四、鸡传染性法氏囊病琼扩试验 五、鸡传染性喉气管炎的诊断 六、传染性支气管炎的诊断及防制 七、包涵体肝炎的实验室诊断 八、禽脑脊髓炎的实验室诊断 九、鸡传染性贫血的实验室诊断 十、禽霍乱的诊断 十一、鸡白痢的检疫 十二、鸡枝原体的检疫 十三、大肠杆菌病的实验室诊断 十四、禽流感的实验室诊断 十五、炭疽的诊断和防治 十六、布病的实验室诊断　 十七、结核的实验室诊断　 十八、巴氏杆菌的实验室诊断　 十九、口蹄疫的实验室诊断　　　　 二十、兔瘟的诊断 二十一、乳胶凝集试验检测猪细小病毒 二十二、犬细小病毒的实验室诊断 二十三、间接血凝抑制试验测定猪瘟抗体 二十四、乳胶凝集试验检测猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体 二十五、乳胶凝集试验检测猪伪狂犬病毒抗体 二十六、乳胶凝集试验测猪萎缩性鼻炎病毒抗体 二十七、猪圆环病毒的血清学诊断 第三部分 疫苗制造技术 新城疫Ⅰ系弱毒疫苗的制造 二、鸡新城疫Ⅱ系弱毒疫苗的制造 三、鸡新城疫LaSota系弱毒疫苗的制造 四、鸡痘鹌鹑化弱毒疫苗制造 五、氢氧化铝胶苗的制造 六、动物脏器组织灭活疫苗的制造 七、油乳剂灭活疫苗的制造 八、猪瘟兔化弱毒苗的制备 第四部分 抗体制备技术 传染性法氏囊病高免卵黄抗体的制备 二、抗新城疫高免血清的制备 三、猪瘟高免血清的制备及应用 四、抗体提纯技术 第一部分 基本技术 一、消毒 1．人员的消毒：所有进入禽场生产区的人员，必须在更衣室内更衣换鞋，然后方可进入场区。要控制或谢绝参观人员进入禽舍内。在场区(生产区)入口应设有喷雾消毒装置和消毒池。喷雾消毒药物可用0.1%新洁尔灭或3～5%来苏儿，使用新洁尔灭时应避免与肥皂或碱类接触，以防减弱其杀菌能力，消毒池要经常更换消毒药液。凡进入场内的人员及车辆都必须经过消毒。也可采用紫外线照射消毒。 2．禽舍消毒：禽舍在消毒前必须进行彻底清扫与冲刷，以增强消毒效果，一般按以下步骤进行消毒： 向禽舍的空间喷洒雾状消毒剂，使禽舍内空中飘浮的尘埃沉落，常用药为3～5%的来苏儿溶液。 将舍内一切可移动的设备移出。进行洗刷和消毒。夏季应尽量利用阳光曝晒消毒；用1～2%热氢氧化钠，20%草木灰，10～20%石灰乳洗刷墙壁和地面；金属笼或用具冲洗晾干后，用0.1%新洁尔灭溶液喷洒，或用火焰喷射消毒。 最后将禽舍密闭堵严，用甲醛熏蒸消毒。根据禽舍污染微生物种类和密闭程度，一般每平方米空间用甲醛20～40毫升，高锰酸钾是甲醛的半量(即2毫升甲醛、1克高锰酸钾、1毫升清水)放在大容量瓷器内进行熏蒸消毒。操作时先把盛有高锰酸钾的瓷器放在需要烟熏消毒的地方，然后加入甲醛，决不可将高锰酸钾加到甲醛中去，这两种药物结合后生成大量的热，所以在操作完后应立即离开现场，切忌使烟雾进入眼内。熏蒸时间最少2～4小时，延长至8小时更好，消毒后，要打开窗户，排除剩余的甲醛蒸气，消毒后的禽舍应闭置1～2周后再使用。 3．用具的消毒：禽场的蛋箱、笼子、雏盒、工具等。应先洗刷干净，晾干或晒干，再放到密闭的房间内用甲醛熏蒸5～10小时，进行严格消毒。 4．孵化消毒：种蛋的消毒方法很多，下面介绍几种：(1)福尔马林消毒法：将种蛋放入孵化机内，关闭进、出气孔和鼓风机。每立方米用30毫升福尔马林，另加15克高锰酸钾，经20～30分钟后，打开门和进出气孔，开动鼓风机。这种方法对病毒和霉形体的消毒效果显著。(2)新洁尔灭消毒法：新洁尔灭溶液呈碱性，忌与肥皂、碘、高锰酸钾配用。消毒种蛋时配成千分之一浓度的溶液。喷于种蛋表面。有较强的除污和消毒作用。(3)氯消毒法：将种蛋浸入含1.5%活性氯的漂白粉溶液中3分钟，取出晾干。(4)高锰酸钾消毒法：用千分之5的高锰酸钾溶液泡种蛋1分钟，取出晾干。注意高锰酸钾溶液必须现配现用。(5)红霉素消毒法：将孵化前的种蛋先加温至37.8℃，然后置于2～4℃红霉素溶液中。浸泡15分钟。红霉素溶液的浓度是每1000毫升含400～1000毫克。(6)氢氧化钠消毒法：将种蛋浸泡在0.5%的氢氧化钠溶液中5分钟。能有效地杀灭蛋壳表面的鼠伤寒沙门氏菌。(7)庆大霉素消毒：用100毫升水含 5．环境消毒：禽场周围每季度喷洒消毒一次，运动场每年更换一次表土或清扫干净用火焰彻底消毒。 6．粪便消毒：最常用生物热消毒法。即用堆粪法进行消毒。在距离场100米以