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莱卡荧光显微镜DMI4000B操作说明
DMI4000B操作规程
该机器配有三种观察方法:明场、相差和荧光,显微镜电源开关在独立的控制器CTR4000上。
明场:适合观察本身有颜色的或已经染过色的样品
接通电源,开机初始化。 将聚光镜转盘转至BF位置,先手动选择低倍物镜(便于找目标位置通过载物台移动杆),通过调焦旋钮后方由上到下的第二个按键(或BF或CHG-TL)来切换到明场状态(液晶显示屏上看到TL-BF),调小孔径光阑以增强对比。再调节焦距(先粗调后细调)及灯亮度(机身左下侧的亮度旋钮或聚光镜转盘上孔径光阑)至图片清晰为止.
相差:适合观察本身无色或不能染色的样品如活细胞
接通电源,将聚光镜转盘下方的孔径光阑拨杆拨至PH位置,手动选择较低倍物镜(便于找目标位置通过载物台移动杆),通过调焦旋钮后方由上到下的第二个按键(或标有CHG-TL或PH)来切换到相差状态(液晶显示屏上看到TL-PH)。将聚光镜转盘转到相应位置(通常:5倍物镜对应PH0,10X和20X物镜对应PH1, 40X物镜对应PH2位,如位置不对液晶屏上会有闪烁数字提示),再调节焦距(先粗调后细调)及灯亮度(机身左下侧的亮度旋钮)至图片清晰为止。
荧光:
按下显微镜左下侧的TL/IL按键直到显示屏上出现fluo,其余操作见后述(第四页)
孔径光阑
目镜屈光度调节
观察方法切换按键
拍照:
将显微镜右侧调焦轮后面方的分光拉杆拉出,此时光线进入相机,开启显微镜在初始化完成后开启电脑上拍照软件leica qwin(需要加密钥匙,祥见下述:)。
双击桌面Leica Qwin 图标进入软件主界面,点击下拉菜单“图像”→“图像预览”进入预览界面,在该界面下调节好相关参数后点击“采图”将图片拍照进入主界面,再在主界面“文件”→“另存为”将图片保存到目标位置。
预览界面详述
“采图”:调好下述参数后点击将活图像采集(就是拍照)到主界面
:自动白平衡,点击后软件会对活图像的色彩进行自动调整
:自动曝光和手动曝光之间切换,手动曝光时左边的参数显示为曝光时间(改变时间的长短得到一幅明暗适中的图片。建议:调亮灯泡亮度,尽量调短曝光时间以提高活图像传输的实时性);自动曝光时显示的是亮度(改变亮度得到一幅明暗适中的图片)。
:图像的对比度调节,一幅明暗适中的图片对应的该框中的柱方图应该是覆盖宽广,三个小三角形用来调节明亮对比
显示图像来源
软件默认保存上次使用时的参数设置
鼠标右击选择分辨率,建议用该分辨率2088x1550
右击选择“临时的”,因随时有可能在右边图像区域作白平衡
鼠标右击选择8或16位 软件方法去除光路灰尘
鼠标右击选择彩色还是黑白图像(灰度)
鼠标右击选择1或1.5(建议用1,若改为1.5软件可能需重新校准)
鼠标右击选择启用与否及启用的程度
拍照部分区域图片,建议在活图区域鼠标左键画目标框并选择“感兴趣的区域”再点“采图”就只拍所画框中的部分图像。若想再次拍整张照片左键去掉这个“√”
右击选择分辨率
右击选择显示模式,默认标准,区别在于图像显示质量及实时性
鼠标左键点击,软件提示曝光情况:红色曝光过度蓝色不足
在活图区域鼠标左键画目标框并选择相应内容以局部为基准调焦
在活图区域鼠标左键画目标框并选择相应内容软件判断聚焦情况
在活图区域鼠标左键画目标框并选择相应内容以局部为基准自动曝光
在活图区域鼠标左键画目标框并选择相应内容再次调整色彩
此两项不可用
图像垂直反转
图像水平反转
调色框常现
鼠标左键打勾“√”,点“采图”后预览界面自动关闭
注意事项:
1:防尘,用完显微镜后应在灯箱冷却后盖好防尘罩,并定期用湿软抹布擦拭 机身上的灰尘。
2:防潮,摄像头若超过两天不使用应将其置于干燥器中,机身旁边最好也要放置干燥剂。
3:镜片上的灰尘可以用气球吹走,如非不得已不要擦拭镜片,镜片的擦拭应以下方法进行:以棉签外缠擦镜纸蘸无水酒精(乙醚或专用镜头清洗液)由中间向外轻轻划圆圈将灰尘带离镜片中心即可,整个过程一定要轻用力否则易损伤镜头。
4:不要对显微镜任何部件进行加油处理,如确有必要请先致电我司技术人员
5:使用完毕后应待灯箱冷却后盖上防尘罩,100瓦灯泡发热量大,会烫伤防尘罩
6:操作过程中若未能看到样品,请检查各处分光拉杆位置是否正确。
荧光:
1)按透射光/英光转换键
2)按相应的荧光滤块键,并参考参数屏上的显示:
A: 代表紫外激发(目视光为蓝色);
I 3:代表蓝色激发(目视光为绿色);
N2.1:代表绿色激发, (目视光为红色)
其他参数调节
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