医学第10章 甾体激素类药物的分析.ppt

（3） O2与光线的影响 反应过程 反应产物 怕光 →避光、快速 O2影响颜色强度和稳定性 →隔绝空气、 快速、充N2 （4）碱的种类及加入顺序 反应应在强碱性（pH13.75）条件下进行 以氢氧化四甲基铵的结果最佳 加入顺序： 碱试液 四氮唑盐 皮质激素溶液 ? ? （5） 温度与时间 t℃↑→ν↑→甲瓒分解↑→%↓ ChP 25℃ 40～45′ BP 30℃ 1h C3－酮基 肾上腺皮质激素、雄性激素和蛋白同化激素、孕激素 1. 原理 二、异烟肼比色法 ? HCl （缩合） 异烟腙（黄） 酮基 异烟肼 ? ? ? ? - 3 C 异烟腙（黄色） 2. 方法 对照品法 暗45′ ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 55 ℃ 异烟肼 挥去乙醇 对照液 供试液 A 3. 讨论 （1）反应速度 C3= O ＞ C17= O 、 C20= O C11= O 不反应 反应专属性 C3－酮基 （2）溶剂的选择 异烟肼盐酸盐→甲醇、乙醇 无水甲醇 无水乙醇 （3）水分、O2与光线的影响 含水量↑→腙水解↑→A↓→%↓ 不挥发溶剂、不吸收水分时→ O2与光线无影响 （4） 酸、异烟肼的量 盐酸 : 异烟肼 = 2 : 1 样品 : 异烟肼 = 1 : 8 →ν↑ 酸度↑→ 异烟肼盐↓ 酸度↓→ A↓ 1. 原理 三、Kober反应比色法 λmax=465 λmax=515 △ △ 桃红 黄色 雌激素 H2SO4-乙醇 H2O 四、UV法 △４-3-酮 240nm（±） 肾上腺皮质激素 雄性激素和蛋白同化激素 孕激素 苯环 280nm（±） 雌激素 五、HPLC法 USP、BP、JP均采用RP－HPLC（大多内标法） 第十章 甾体激素类药物的分析 第一节 甾体激素药物的分类、化学结构及理化性质 第二节 鉴别试验与特殊杂质检查 第三节 含量测定 基本结构：环戊烷骈多氢菲 A B C D 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 基本骨架 分类： 甾体激素 肾上腺皮质激素 性激素 雄性激素及蛋白同化激素 孕激素 雌激素 一、结构与性质 1. 肾上腺皮质激素 主要活性基团 性 质 △4 – 3 – 酮 UV、与羰基试剂反应 C17 – α – 醇酮基 还 原 性 氢化可的松 2. 雄性激素及蛋白同化激素 主要活性基团 性 质 △4 – 3 – 酮 UV、与羰基试剂反应 C17 – β – 羟基 可成酯 丙酸睾酮 3. 孕激素 主要活性基团 性 质 △4 – 3 – 酮 UV、与羰基试剂反应 C17 –甲酮基 与亚硝基铁氰化钠反应 黄体酮 4. 雌激素 主要活性基团 性 质 A环为3–OH 苯环 UV、与重氮苯磺酸盐反应 C17 –乙炔基 与AgNO3反应 C17 –羟基 可成酯 炔雌醇 第二节 鉴别试验及特殊杂质检查 1. 呈色反应 甾体激素类药物 呈色 H2SO4 H3PO4 HClO4 HCl 一、鉴别试验 （1）与强酸的呈色反应 甾酮类激素药物 呈色 羰基试剂 ① C3–酮基和C20–酮基 常用的羰基试剂： 2,4-二硝基苯肼、异烟肼、硫酸苯肼 （2） 官能团的反应 肾上腺皮质激素药物 呈色 四氮唑盐 OHˉ ② C17 – α – 醇酮基 还原性 具有甲酮基或活泼亚甲基的甾体激素类药物 呈色 亚硝基铁氰化钠 间二硝基酚 芳香醛 ③ 甲酮基 黄体酮 蓝紫色 亚硝基铁氰化钠 其他甾体 淡橙色 不显色 有机氟 Fˉ 有机破坏 有机氯 Clˉ ④ 有机卤素 茜素氟蓝 硝酸亚铈 硝酸—硝酸银 AgCl↓ 呈色 肾上腺皮质激素药物 Cu2O↓橙红色 碱性 酒石酸铜 2. 沉淀反应 Ag↓黑色 氨制硝酸银 含炔基的甾体激素 银盐沉淀 硝酸银 ↓ 3. 制备衍生物测定m.p. 4. 水解产物的反应 △４-3-酮 240nm 苯环 280nm 5. UV法 6. IR法 7. TLC法 主要用于甾体激素类药物制剂的鉴别 8. HPLC法 1.游离磷酸盐 地塞米松磷酸钠 氢化可的松磷酸钠 倍他米松磷酸钠 氢化泼尼松磷酸钠 对照品法 二、特殊杂质检查 方法： ? ? 　 对照液 供试液 对 样 还原 钼酸铵 A A nm ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 740 2. 甲醇和丙酮 （灵敏度法） 甲醇 不得出峰 检测限= 3.1ng 丙酮 ≤5.0% 内标法 + 校正因子 GC法 ?