果蝇三点测交实验.docxVIP

实验报告 2011年11月2日—2011年11月27 科目 遗传学实验 题目 果蝇连锁互换定律的验证 仪器编号___ 摘要： 本实验通过白眼、小翅、焦刚毛三隐性雌果蝇与野生型雄果蝇杂交，得到F1代后使其自交，统计F2代各类果蝇数目，进行连锁分析并验证连锁互换定律。 引言： 生殖细胞形成过程中，位于同一染色体上的基因是连锁在一起，作为一个单位进行传递，称为连锁律。在生殖细胞形成时，一对同源染色体上的不同对等位基因之间可以发生交换，称为交换律或互换律。 连锁和互换是生物界的普遍现象，也是造成生物多样性的重要原因之一。一般而言，两对等位基因相距越远，发生交换的机会越大，即交换率越高；反之，相距越近，交换率越低。因此，交换率可用来反映同一染色体上两个基因之间的相对距离。以基因重组率为 1%时两个基因间的距离记作1厘摩（centimorgan，cM）。 基因座位很近，只发生一次交换，重组值＝交换率 基因座位较远，可发生两次交换，重组值＜交换率 基因图距就是通过重组值的测定而得到的。如果基因座位相距很近，重祖率与交换率的值相等，可以直接根据重组率的大小作为有关基因间的相对距离，把基因顺序地排列在染色体上，绘制出基因图。如果基因间相距较远，两个基因往往发生两次以上的交换，这是如果简单的把重组率看作交换率，那么交换率就会被低估，图距就会偏小。这时需要利用试验数据进行校正，以便正确估计图距。基因在染色体上的相对位置的确定除进行两个基因间的测交外，更常用的是三点测交法， 三点测交法就是研究三个基因在染色体上的位置。如a、b、c三个基因是连锁的，要测定三个基因的相对位置可以用野生型果蝇（+++，表示三个相应的野生型基因）与三隐性果蝇（abc，三个突变型基因）杂交，制成三因子杂种abc/+++，再用三隐性个体对雌性三因子杂种进行测交，以测出三因子杂种在减数分裂中产生的配子类型和相应数目。由于基因间的交换，除产生亲本类型的两种配子外，还有六种重组型配子，因而在测交后代中有8种不同表型的果蝇出现，这样经过数据的统计和处理，一次试验就可以测出三个连锁基因的距离和顺序，这种方法，就叫三点测交或三点试验。 通过三点测交的方法，也可根据F2代果蝇的种类数量，验证连锁互换定律。 实验器材与材料： 黑腹果蝇（Drosophila melanogaster）品系： 野生型黑腹果蝇，白眼、小翅、卷刚毛三隐性果蝇、野生型果蝇（+++）：红眼，长翅，直刚毛。 器材：.解剖镜、毛笔、麻醉瓶、玻璃板、标签、吸水纸、培养瓶、酒精棉。 药品：.乙醚、75%乙醇。 实验步骤： 选三隐性雌性处女蝇（wmsn/wmsn ）和野生型雄蝇（＋＋＋/Y ）4对置于新鲜培养瓶中作杂交，贴上标签，注明亲本类型，实验日期，组别及姓名。妥善保管，温箱下培养。注意谨防瓶塞掉出、瓶子摔破，避开阳光直射，保暖。 7天后F1蛹出现，倒净杂交亲本。 再4~5天后，子一代成蝇出现，进行观察。F1雌蝇全部是野生型，雄蝇全部是三隐性。 从F1代中选6对果蝇，放到指管中，在23℃下培养。7~8天后倒去亲本。 再过4~5天，F2代成蝇出现。开始观测。果蝇倒出麻醉，放在玻璃板上，用解剖镜检查眼色、翅形、刚毛，各类果蝇分别计数。统计过的果蝇倒掉。 过2天后再检查第二批。最多可连续检查7~8天，即3~4次。自第一批果蝇孵出10天内是可靠的，再迟时F3代可能会出现。 实验结果 统计F2代各类果蝇的数目，得到下表: 　　　　　　　　表1：F2代各类果蝇数目统计 　w/m/sn 雄果蝇 雌果蝇 总数 （+++） 39 50 89 178 （---） 38 51 89 （++-） 0 1 1 3 （--+） 0 2 2 （+-+） 6 15 21 37 （-+-） 8 8 16 （-++） 10 7 17 34 (+--) 6 11 17 总数 107 145 252 252 表2：F2代果蝇交换重组值的计算 测交后代表型 观察数 重组部位 w/m/sn m—sn m-w w-sn （+++） 89 178 （---） 89 （++-） 1 3 √ √ （--+） 2 （+-+） 21 37 √ √ （-+-） 16 （-++） 17 34 √ √ (+--) 17 总计 252 40 71 37 重组值 15.87% 28.17% 14.68% 分析讨论 1. 性状特征：三隐性果蝇（wmsn）个体的眼睛是白色的（w）；翅膀比野生型的翅膀短些，翅仅长至腹端，称小翅（m）；刚毛是卷曲的，称焦刚毛或卷刚毛（sn）。这三个基因都位于X染色体上，所以在本实验中可以同时进行伴性