NGS系列讲座——NGS基本原理.pptxVIP

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2018-10-12 发布于河北
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NGS系列讲座——NGS基本原理

NGS系列讲座（一）——NGS简介及原理2017/06/01魏冬凯Outline二代测序技术背景Solexa测序原理Outline二代测序技术背景Solexa测序原理其他平台测序技术简介什么是DNA测序？测序的研究对象是什么？DNA测序（DNA sequencing，或译DNA定序）是指分析特定DNA片段的碱基序列，也就是腺嘌呤（A）、胸腺嘧啶（T）、胞嘧啶（C）与鸟嘌呤的（G）排列方式。 ——百度百科测序主要研究的是DNA一级结构，不涉及DNA的二级、三级结构DNA合成的基本过程ddNTPdNTP一代测序Frederick “Fred” Sanger末端终止法（ABI 3700）使用特异性引物与单链模板DNA退火，在DNA聚合酶作用下进行延伸反应，用ddNTP终止，用荧光染料标记4种不同的碱基，通过计算机自动读出。Sanger测序T G C G C G G C C C APrimer5’A C G C G C C G G G T ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?3’5’Sanger 测序G T C T T G G G C TT G C G C G G C C C APrimer5’A C G C G C C G G G T C A G A A C C C G A T C G C G 3’5’Sanger 测序G T C T T G G G C T A G C G CT G C G C G G C C C AT G C G C G G C C C APrimer5’5’21 bpG T C T T G G G C TA C G C G C C G G G T C A G A A C C C G A T C G C G 3’5’Sanger 测序G T C T T G G G C T AT G C G C G G C C C AT G C G C G G C C C AT G C G C G G C C C APrimer5’5’21 bpG T C T T G G G C T5’26 bpG T C T T G G G C T A G C G CA C G C G C C G G G T C A G A A C C C G A T C G C G 3’5’Sanger 测序GT G C G C G G C C C AT G C G C G G C C C AT G C G C G G C C C AT G C G C G G C C C APrimer5’5’21 bpG T C T T G G G C T5’26 bpG T C T T G G G C T A G C G C5’22 bpG T C T T G G G C T AA C G C G C C G G G T C A G A A C C C G A T C G C G 3’5’Sanger 测序G T C T T G G G CT G C G C G G C C C AT G C G C G G C C C AT G C G C G G C C C AT G C G C G G C C C AT G C G C G G C C C APrimer5’5’21 bpG T C T T G G G C T5’26 bpG T C T T G G G C T A G C G C5’22 bpG T C T T G G G C T AA C G C G C C G G G T C A G A A C C C G A T C G C G 5’3’5’12 bpGSanger 测序G T C T TT G C G C G G C C C AT G C G C G G C C C AT G C G C G G C C C AT G C G C G G C C C AT G C G C G G C C C AT G C G C G G C C C APrimer5’5’21 bpG T C T T G G G C T5’26 bpG T C T T G G G C T A G C G C5’22 bpG T C T T G G G C T AA C G C G C C G G G T C A G A A C C C G A T C G C G 5’3’5’12 bpG5’20 bpG T C T T G G G CSanger 测序T G C G C G G C C C AT G C G C G G C C C AT G C G C G G C C C AT G C G C G G C C C AT G C G C G G C C C AT G C G C G G C C C A5’21 bpG T C T T G G G C T5’26 bpG T