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* 3.8 固相萃取和固相微萃取技术Solid?Phase?Extraction??SPE And Solid?phase?Micro-Extraction??SPME 皆属于非溶剂型萃取分离技术，为柱色谱分离过程，其分离机理、固定相和淋洗液溶剂的选择与HPLC相似。SPE自70年代商品化问世以来，发展迅速，目前SPE是一种最常用的样品前处理技术，主要用于样品组分的分离、纯化和浓缩。 3.8.1 固相萃取（SPE） 1、固相萃取装置：固相萃取柱是一根直径为数毫米的小柱子。由柱管、烧结垫和固定相 三部分组成。 固相萃取小柱 与HPLC比较，(1) 柱效低（柱床短、填料粒径大, n=10－50塔板）,只能分开保留性质有很大差别的化合物;(2) 目标物被固定相牢固吸附或完全不被保留;(3)?SPE柱是一次性柱。 2、固相萃取的原理 当样品溶液通过固相萃取柱时，由于固体吸附剂对目标化合物的吸附能力大于母液对该化合物的溶解能力，使目标化合物被吸附在吸附剂表面，而其他组分则流出柱子。再用洗脱液将目标化合物洗脱或加热解吸附，以达到分离和富集目标化合物的目的。 目标化合物与吸附剂的极性越接近，则亲和力越大，保留越强。 3、固相萃取法的优点 与传统液液萃取法相比，（1）富集倍数高，分离选择性和重现性好，被萃物的回收率高；（2）；不需要用超纯溶剂，所需溶剂少，环境污染小；（3）操作简单、省时（为液-液萃取的1/12） 、省力（可批量进行），可消除乳化现象，易于实现自动化等。 4、固相萃取法的模式 反相萃取 正相萃取 离子交换萃取 免疫亲和萃取 吸附剂：非极性或弱极性，如硅胶键合C18（ODS最常用), C8, C4，C2, -苯基、高聚物等。 反相固相萃取（Reversed-Phase) 洗脱溶剂：极性的甲醇、乙腈、丙酮及乙酸乙酯等。 应用：可以从强极性的溶剂中吸附非极性～中等极性的化合物。 如抗生素、咖啡因、药物、染料、芳香油、脂溶性维生素、杀菌剂、除草剂、碳水化合物、苯酚、类固醇、表面活性剂、茶碱等。 C4 、C8 ，-苯基的疏水性弱, 对非极性物质保留较C18弱. 硅胶表面 溶剂膜 非极性烷基 极性功能团 有机分子 非极性部分 硅胶-C18H37，ODS HLB柱 hydrophilic-lipophillic balance HLB: 亲脂的二乙烯基苯和亲水的N-乙烯基吡咯烷酮按比例聚合而成。 HLB和ODS比较： pH适用范围宽： 1-14 柱子不怕抽干，碳链不会塌陷。 可通过调节样品溶液的pH值来选择性的保留酸性、中性和碱性化合物。 高保留性 正相固相萃取 极性吸附剂：如硅胶键合-NH2、-CN、二醇基等 洗脱溶剂：非极性或弱极性，如正己烷、环己烷等。 应用：从非极性或弱极性溶剂中吸附极性化合物。 -NH2：有较强的氢键结合能力，对某些多官能团化合物如甾体、强心甙等有较好的分离能力。 -CN：从样品溶液中吸附极性化合物, 如酚类、类固醇等 -Diol(二醇基): 可用于分离有机酸、甾体和蛋白质。 形成氢键的强弱: -NH2 -CN二醇基 离子交换固相萃取 类似离子交换分离法，见《分析化学》分离一章。 弱阳离子交换柱WCX (含有－COOH、磷酸基－PO3H2、酚基－ －OH的离子交换树脂) 强阳离子交换柱 SCX (内装R－SO3H交换剂) 强阴离子交换柱 SAX 弱阴离子交换柱 WAX 以伯胺（-NH2）、仲胺(-NHR)或叔胺（-NR2）为交换基团的离子交换树脂。 离子选择性吸附顺序 离子浓度相近时，电荷高，水合离子半径小的离子易被吸附。 Fe3+Cr3+Al3+Ca2+Mg2+K+NH4+Na+H+Li+ 强酸性阳离子交换柱 : 弱酸性： H+ Fe3+ Cr3+ Al3+ Ca2+ Mg2+ K+≈ NH4+ Na+ Li+ 强碱性： Cr2O72- SO42- CrO42- NO3- Cl- OH- F- HCO3- HSiO3- 弱碱性：OH-Cr2O72-SO42-CrO42-NO3-Cl-HCO3- 离子洗脱顺序 吸附顺序中位于前面的离子可以洗脱后面的离子 高浓度时, 可用顺序后面的离子洗脱前面的离子。 洗脱剂可以是酸或碱，能中和待分析物所带电荷，或中和键合硅胶官能团所带电荷。 *