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实验六标本中病原菌的分离培养与鉴定
实验六 标本中病原菌的分离培养与鉴定 一、粪便中病原菌的分离培养与鉴定 粪便中病原菌检测一般程序 粪便?SS培养—挑取可疑菌落?双糖铁培养?生化 反应?血清学反应鉴定 双糖铁培养基 上层:斜面 蛋白胨 硫酸亚铁 乳糖 指示剂:酚红 下层:半固体 蛋白胨 葡萄糖 指示剂:酚红(酸黄碱红) (一)操作 粪便中病原菌的分离培养 粪汁?SS培养基 粪便中病原菌的生化反应 SS培养物?双糖铁培养 SS培养物?尿素培养 SS培养物?蛋白胨水培养 (二)示教 吲哚试验 大肠杆菌(+) 、伤寒杆菌(-) 糖酵管 H2S试验 尿素分解试验 玻片凝集试验 二、痰液中抗酸菌的染色检查法(操作) 齐-尼抗酸染色 石炭酸复红——3-5’→3%盐酸酒精—脱色1’→美蓝1’ 结核杆菌呈红色;非抗酸菌及细胞杂质呈蓝色 三、观察豚鼠感染结核杆菌的标本(示教) 四、芽胞菌的形态及培养物的观察(示教) 厌氧芽胞菌 厌氧芽胞菌革兰染色 厌氧芽胞菌培养物 破伤风梭菌:庖肉培养 产气荚膜梭菌:庖肉培养、牛奶培养、血平板 需氧芽胞菌 炭疽杆菌革兰染色 炭疽杆菌普通平板培养物 五、厌氧培养法 厌氧罐法 庖肉法 碱性焦性没食子酸法(示教) 六、实验报告 绘图:结核杆菌抗酸染色 记录肠道杆菌的主要生化反应结果 * 大肠埃希菌 沙门菌 乳糖分解试验初步鉴别肠道杆菌有无致病性 + :非致病性肠道杆菌 乳糖分解 - :致病性肠道杆菌 SS培养基 (salmonella-shigella) 指示剂:中性红(酸红碱黄) 大肠杆菌 伤寒杆菌 乳糖 ? - 葡萄糖 ? + 产气荚膜梭菌 破伤风梭菌
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