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第四章-食用菌的消毒与灭菌
四、煮沸消毒法: 将水煮沸至100℃,保持5~10分钟可杀灭细菌繁殖体;一般保持1~3小时可杀灭细菌芽胞。 五、射线和微波灭菌 X射线能量对微生物的营养体和休眠体有很强的致死作用。可用于食用菌生产中的工具、器材、培养基的灭菌。 过氧乙酸无色至微黄色液体,有刺激性、腐蚀性、挥发性。 1.5%熏蒸7ml/m3 0.2%洗手 0.5%浸泡 0.5%喷雾 使用 (二)表面活性剂 脱水剂脂溶剂蛋白质变性剂 乙醇 70%~75%效果最好 皮肤、器皿擦拭或浸泡 浓度 高浓度效果差 无水的无杀菌作用 机制:降低表面张力,改变细胞膜的透性及原生质的结构状态,干扰微生物的新陈代谢,使蛋白质凝固性。 酚类 石炭酸:3%~5%浸泡或喷雾 来苏尔 刺激性小效力比苯酚强4倍3%~5%喷雾、擦洗1%-2%消毒手(3min) (三)熟石灰 提高pH、消毒 破坏秸草表面的蜡质 提供钙素养料 抑制酵母菌及霉菌 作用 使用 1%~2%拌料5%~10 %喷、浸、刷、喷干撒湿环境或霉染处 器皿包装→160℃~170℃ 2h 干燥箱 使用 注意 70℃以下开箱取物勿超180℃随用随开包 (二)湿热灭菌 特点 范围广、温度低、效果好、时间短 热蒸气或热水 热源 方法 高压蒸汽灭菌 常压蒸汽灭菌 巴 氏 消 毒 蛋白质凝固点与其含水量的关系 56 74~80 80~90 145 160~170 50 25 18 6 0 凝固温度(℃) 蛋白质含水量(%) 热蒸气穿透力大 蛋白质凝固点随其含水量的增加而降低 因为 干热灭菌与湿热灭菌穿透力的比较 灭菌完全 10l 10l 101 3 105.3 饱和蒸汽 湿热 灭菌不完全 70以下 72 86 4 130~140 空气 干热 100层 40层 20层 结果 透过布层温度(℃) 加热时间(h) 温度(℃) 传导介质 加热方式 高压蒸气灭菌 概念 利用高压产生的高蒸汽温度杀灭微生物的方法 原理 水沸点随热蒸汽压力的增加而升高 密闭锅 蒸气多 压力高 沸点高 步骤: 装锅→加热排气→升压→保压灭菌→降压出锅 关键:排净冷空气 注意 灭菌时间和压力因物而异升降压力要稳灭菌时间从保压时算起压力降至“0”才能开盖 使用 排气 纯蒸气压力与温度的关系 1kg/cm2=0.098Mpa(兆帕)=98Kpa(千帕) 2.常压蒸汽灭菌 概念 利用常压产生的100℃ 蒸汽温度进行灭菌的方法 特点 设备简,成本低,灭温低,时间长 用法 一次性灭菌(100 ℃,10余h) 尽快达到100 ℃达到100 ℃时开始计时灭菌中勿降温,勿干锅 灭菌池 3.常压间歇灭菌 指用常压蒸气分阶段灭菌,中间间歇一定时间,连续几次才达到灭菌效果的方法,又称达尔灭菌法。 将培养基或其他灭菌物品放在锅内,当温度上升到100℃时,保持30min到1h左右,杀死培养基内的微生物的营养体,但不能杀死芽孢。将灭菌后的培养基置于25~35℃条件下培养24h,诱发其中残存的芽孢萌发成营养体,然后对培养基进行第二次灭菌30min,以杀死新萌发的微生物营养体。为彻底杀灭培养基内的芽孢,再在25~35℃条件下温24h,进行第3次灭菌,达到彻底灭菌的目的。 二、巴氏消毒 概念 利用低于100℃的温度杀灭有害微生物的方法 培养料堆积发酵 料温60℃~70℃杀死有害微生物 方法 三、紫外线灭菌 概念 利用电子射过水银气体 产生的紫外线而杀菌的方法 杀菌机理 直接:使蛋白质、酶等变性失活间接:空气中产生臭氧或过氧化氢 使用 有效距离:1.5~2.0m理想波长:265nm 30w紫外灯照30min→避光30min 紫外线的杀菌波长在200~300nm 便携式 透力很弱定期更换灯管只起辅助作用伤眼睛和皮肤 特点 第二节 化学消毒灭菌法 概念与划分一、气雾消毒灭菌法 二、液体消毒灭菌法 利用化学药剂杀灭或抑制微生物的方法 概念 抑菌剂 消毒剂 灭菌剂 浓度 液态: 气态: 状态 划分 作用机制:使菌体细胞蛋白质变性、改变细菌细胞膜透性或干扰细菌的酶系统,导致菌体死亡或生长受抑制。 一、气雾消毒灭菌法 (一)要求 密闭条件下保持一定时间 (二)种类 甲醛 气雾盒 机理:结合蛋白质氨基, 使其变性 ,使细胞原生质失去活性。 喷:5%熏:10ml/m3+1/2KMnO4 用法 甲醛 有刺激性和腐蚀性 气雾消毒盒 粉末状 刺激性小 扩散力及渗透性强 特点 2~6g/m3→点燃( 熏30min以上) 用法 杀灭霉菌、细菌、病毒菌、黄曲霉 目前有菇保一号、科达气雾消毒盒,克霉灵气雾消毒剂 二、液体消毒法 固体或液体药品 水
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