第六章：病毒感染与防制必威体育精装版版病毒学精品电子课件.ppt

* 病毒疫苗的分类 新型疫苗： 基因缺失活疫苗 基因工程载体疫苗 基因工程亚单位疫苗 病毒样颗粒疫苗 蛋白质工程苗 合成肽疫苗 遗传重组疫苗 核酸疫苗 基因缺失活疫苗 基因工程亚单位疫苗 1. 减毒活疫苗 一、传统病毒疫苗 减毒活疫苗是通过不同的方法手段，使病毒的毒力（即致病性）减弱或丧失研制成的疫苗。疫苗由完整的病毒组成。 减毒活疫苗是目前效果最好的疫苗，其特点是由活的病原体组成。 优点： 可诱导体液免疫、细胞免疫和黏膜免疫，使机体获得较强的免疫保护。 病毒可以在体内增殖，长时间和机体细胞作用，诱导较强的免疫反应。 一般只需要接种1次，即可以达到满意的效果。 可以通过自然感染途径接种，产生全身免疫反应和局部免疫反应。 可以通过所有病毒抗原刺激机体，产生保护作用。 一般不需要在疫苗中添加佐剂，不需要加入灭活剂 生产过程中一般不需要进行浓缩纯化。 缺点： 由于是活病毒制剂，可能污染其他活的病原体。 一些减毒活疫苗仍保留有一定的毒力。 传统的减毒活疫苗可能出现病毒毒力回复，即“返祖”现象。 在一些免疫缺陷的个体中可能诱发严重疾病。 野毒株感染有时可导致活疫苗效果降低。 缺损颗粒可以干扰疫苗的免疫效果。 对保存和运输的要求较高。 2.灭活疫苗（死疫苗） 是由完整病毒组成。即用灭活剂处理活的病毒，使其致病性丧失或减弱，但是仍然保持病毒的全部或部分免疫原性。 灭活疫苗和减毒活疫苗的差别在于疫苗中的病毒不具有感染性，在体内不能够增殖。 ①安全性好。 ②其他活病原体污染问题较轻。 ③保存较方便。 ④开发相对简单。 优点： 缺点： ①免疫效果一般低于减毒活疫苗。 ②诱导产生的免疫反应持续时间较短，需要多次免疫接种。 ③灭活剂对病毒抗原性有影响，而且对不同的抗原成分影响不同。 ④一般要求对疫苗制剂进行浓缩纯化。 ⑤一般不能通过自然感染途径接种，不易产生局部免疫反应。 ⑥需要使用佐剂，制剂中存在灭活剂。 3.亚单位疫苗 利用病毒的亚单位成分制成的疫苗。 如：流感病毒血凝素亚单位疫苗、口蹄疫VP1亚单位疫苗 亚单位疫苗的特点和灭活疫苗类似，主要差别是病毒亚单位的体积较小，免疫原性差，有些甚至是半抗原，需要和蛋白质载体偶联后使用。 二、新型病毒疫苗 基因缺失活疫苗 基因工程载体疫苗 基因工程亚单位疫苗 病毒样颗粒 合成肽疫苗 遗传重组疫苗 核酸（DNA）疫苗 利用基因工程技术去除和毒力有关基因或基因片段获得的缺失突变毒株制成的疫苗（不丧失免疫原性） 。 1.基因缺失活疫苗 gene deleted live vaccine 载体疫苗(vectored vaccine)：指利用非致病微生物作为载体，将病毒的保护性抗原基因片段重组到载体微生物基因组中，用表达保护性抗原的微生物作为疫苗。 2.基因工程载体疫苗 空斑纯化 重组病毒TK-/gG-/GP5+构建流程图 通用转移载体pgG-Uni PCR筛选 重组中间转移质粒 IBRS-2 细胞 检测 Southern Western-blot TK-/gG-/LacZ+ ORF5 基因工程亚单位疫苗(gene engineered subunit vaccine)：指用基因工程表达的蛋白制成的疫苗，通常这些抗原必须进行纯化。 3.基因工程亚单位疫苗 适合于病原体难于培养或有潜在致癌性的疫苗研究。 病毒样颗粒(virus like particle, VLP)：仅表达病毒的部分结构蛋白就可以在细胞内装配成病毒样颗粒。 4.病毒样颗粒 PRV Ea TK-/gG-/VP2+ 株的电镜照片 表达PCV2 ORF2的电镜照片 天然PCV2病毒粒子的电镜照片 作为免疫原，病毒样颗粒可通过和病毒感染一样的途径呈递给免疫系统，能够有效的诱导产生中和抗体和其他保护性免疫反应。 B19病毒、乳头瘤病毒等在组织培养中复制较差，不易获得足够的病毒制备疫苗。 通过化学方法合成的多肽，用这些合成肽所制成的疫苗称合成肽疫苗。 ——多肽的序列是根据病毒的保护性抗原设计的。 5.合成肽疫苗 遗传重组疫苗(genetic recombinant vaccine)是通过强弱毒株之间进行基因片段的交换而获得的减毒活疫苗。（不是通过DNA重组技术将野毒株的保护性抗原基因与弱毒株的基因组合） 6.遗传重组疫苗 分节段的RNA病毒的野毒株和不致病的弱毒株在共同感染细胞时，可以发生不同基因片段之间的交换，产生基因重配病毒。用不同的方法可以筛选出对动物不致病，但包含有野毒保护性抗原基因片段的重配病毒，以用于减毒活疫苗的研究。 用对人体不致病的猴轮状病毒或羊轮状病毒，与野毒株重配获得的轮状病毒减毒活疫苗已经上市或批准进行临床试验。 流感重配疫苗? 指直接将编码外源蛋白质的基因和表达调控序列的DNA或RNA作为疫苗免疫动物，