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第十章 双链RNA病毒 10.1 呼肠孤病毒科(Reoviridae) 10.2 双RNA病毒科(Birnaviridae) 10.1 呼肠孤病毒科(Reoviridae) 一、分类 按病毒的宿主范围和致病性不同分为12个属,其中对脊椎动物致病的有6个属: 10.2 双RNA病毒科(Birnaviridae) 一、科的特征 二、传染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus, IBDV) 同义名:传染性法氏囊炎病毒、盖姆波罗病病毒、鸡肾病变病毒 思考题 1、双链RNA病毒包括哪两个科? 2、呼肠孤病毒分为哪几个属?各属中有哪些重要的病毒? 3、双RNA病毒与呼肠孤病毒的主要区别是什么? 4、可采用哪些方法分离培养IBDV? * Reoviridae 呼肠孤病毒科 135000X 正呼肠孤病毒属(禽呼肠孤病毒) 轮状病毒属(轮状病毒) 环状病毒属(蓝舌病病毒、非洲马瘟病毒) 科州蜱传热病毒属(科州蜱传热病毒) 东南亚十二节段病毒属(版纳病毒) 水生呼肠病毒属(草鱼出血热病毒) 二、科的特征 无囊膜,球形病毒粒子,直径60-80nm,双层衣壳,内层衣壳呈二十面体对称,内壳体与核酸构成核心。 基因组为双股RNA,分为10-12个节段,总碱基数18-23kb,总分子量为12-20×106D。 有6-10种结构多肽,细胞浆内复制,某些种有血凝性。 三、蓝舌病毒(Bluetongue virus) Humans not susceptible 蓝舌病病毒(Bluetongue virus),属于呼肠孤病毒科,环状病毒属,双股RNA病毒 基因组为10个双股RNA。 病毒可使鸡胚死亡,表现水肿和出血 病毒存在于病畜血液和各器官中 病毒至少有24个血清型,各型之间无交叉免疫,病毒有基因序列漂移和重配现象 1.病毒的基本特性 2.致病性 以昆虫为传播媒介的反刍动物的一种急性传染病。 OIE规定必须通报的A类传染病(OIE指定的15种A类病)。 主要发生于绵羊,表现为发热、白细胞减少、口鼻和胃黏膜的糜烂性炎症。 病羊:羔羊长期发育不良并有死亡,胎儿畸形,羊毛损坏(变粗而脆),造成很大经济损失。 流涎,面部水肿 蹄冠发炎 口腔黏膜、舌头充血、糜烂 临床症状 季节(昆虫) 实验室诊断 病毒分离 ELISA PCR IFA VN 3. 诊断 传染性法氏囊病毒(禽) 传染性胰坏死病毒(鱼) 病毒颗粒呈二十面体对称,球形,只具单层衣壳,粒子直径约为55-77nm,无囊膜,表面无突起。 基因组为双股、双节段RNA, 病毒体有4-5种结构多肽,在胞浆中复制。 对醚、氯仿和胰蛋白酶有抵抗力,具有很高的热稳定性,IBDV于56℃可存活5h,于60℃存活90min,耐酸(pH3.0)。 1957年,美国甘保罗镇(Gumboro)首次爆发,又称为甘保罗病(Gumboro Disease)。 1962年,Cosgrove首次对该病进行了全面描述,由于病死鸡肾脏肿大,又称为“禽肾病” 1962年,Winterfield等用鸡胚培养法成功地从发病小鸡中分离到病原,并称之为即“传染性法氏囊因子” (Infectious bursal agent) 1970年世界禽病会定义为传染性法氏囊病。 1979年,我国邝荣禄首次报道。 目前,该病呈世界性流行,变异株和超强毒株的出现以及引起的免疫抑制给养禽业造成了巨大的损失。 传染性法氏囊病毒(Infectious Bursal Disease Virus,IBDV)属于双RNA病毒科,禽双RNA病毒属。 无囊膜,二十面体立体对称,直径55-65nm,感染细胞内呈晶格样排列。 1.病毒的基本特性 IBDV对外界抵抗力强,对乙醚和氯仿不敏感。 在pH12时失活,但在pH2时不受影响。 耐冻融,反复冻融5次毒价不降低。 超声波破裂不能灭活。 在鸡舍中可以存活2-4个月,消毒和清洗的鸡舍也难以去除病毒。 IBDV的理化特性 双链、分节段的RNA病毒,A节段约长3.3 kb, B节段约长2.9 kb。 2.IBDV基因组的结构组成 A片段 VP2:主要蛋白 VP3:主要蛋白 VP4:病毒蛋白酶 VP5:功能不清 B片段 VP1:RNA聚合酶 4. 病毒分离培养 分离IBDV比较困难。 鸡胚源细胞培养物分离和连续穿代IBDV非常困难。 鸡胚尿囊腔接种效果差。 鸡胚接种 IBDV在鸡胚上繁殖,选无母源抗体或SPF鸡胚。 5-7日龄鸡胚接种卵黄囊,9-11日龄鸡胚接种绒毛尿囊膜。 感染胚水肿,头部、趾部和肾脏充血、出血,肝脏点状坏死和出血斑。 变异株不致死胚,仅出现肝脏肿大和脾脏肿大。 细胞培养 鸡胚中适应的IBDV毒株可适应细胞培养并产生细胞病变效应。 常用的细胞系由鸡胚成纤维细胞,鸡胚肾细胞
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