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戊巴比妥钠半数有效量ED50的测定
戊巴比妥钠半数有效量ED50的测定
姓名:叶郑涛 学号:1502010080 班级:15级眼本3班
实验目的
测定戊巴比妥钠腹腔注射对小鼠催眠作用的ED50值。
实验材料
实验动物:小鼠(雌雄各半,18g~22g)60只。
器材:鼠笼(2个),天平,注射器(1ml或0.25ml),注射针头(51/2号),棉签(1支)。
药品:戊巴比妥钠溶液(浓度为0.400%、0.320%、0.256%、0.205%、0.164%、0.131%),0.5%苦味酸溶液。
实验方法和步骤
取小鼠60只,随机分为6组,每组10只,称重。各组分别腹腔注射不同剂量戊巴比妥钠40.0、32.0、25.6、20.5、16.4、13.1mg/kg,药液容量均为0.1ml/10g。
以翻正反射消失作为入睡指标,给药15min后,记录各组出现催眠反应的鼠数并记录。
采用公式ED50=lg-1[X m–i(?P-0.5)]计算并用GraphPad Prism 7.0a软件【1】求得腹腔注射戊巴比妥钠出现催眠反应的ED50。
其中X m =最大剂量对数值;
P=动物催眠反应率(用小数表示);
?P=各组催眠反应率的总和;
i=相邻两组剂量比值的对数(高剂量做分子)。
实验结果
不同剂量戊巴比妥钠对小鼠的影响
组别
剂量D
(mg/kg)
lgD
实验鼠数
催眠鼠数
催眠反应百分率(%)
1
40.0
1.6020
10
8
80
2
32.0
1.5051
10
5
50
3
25.6
1.4082
10
3
30
4
20.5
1.3113
10
0
0
5
16.4
1.2144
10
0
0
6
13.1
1.1175
10
0
0
表1. 不同剂量戊巴比妥钠对小鼠的催眠作用
半数有效量和量效关系曲线
图3. 戊巴比妥钠量-效关系曲线
实验讨论
戊巴比妥钠的药理机制
戊巴比妥钠属于中效累巴比妥类镇静催眠药。对中枢神经系统有抑制作用。其随着剂量的增加,中枢抑制作用由弱变强,相应表现为镇静、催眠、抗惊厥及抗癫痫、麻醉等作用。大剂量对心血管也有抑制作用。
小剂量可引起镇静作用,可缓解焦虑、烦躁不安状态。
中剂量可催眠,即缩短入睡时间,减少觉醒次数和延长睡眠时间。
10倍催眠量可引起呼吸中枢麻痹而致死。
戊巴比妥钠在非麻醉剂量时主要抑制多突触反应。减弱易化,增强抑制,与其激活GABAA受体有关。在没有GABA时,戊巴比妥钠能模拟GABA的作用,增加Cl-的通透性,使细胞膜超极化,延长Cl-通道的开放时间。此外,戊巴比妥钠还可减弱或阻断谷氨酸作用于相应受体后去极化导致的兴奋性反应,引起中枢抑制作用。【2】
半数有效量ED50
本次实验观察的是腹腔注射戊巴比妥钠后反应性质的变化,称为质变化,即小鼠翻正反射消失。戊巴比妥钠量-效关系曲线以阳性反应百分率为纵坐标,以剂量为横坐标作图。在这一曲线可以看出的特定位点为半数有效量ED50,即能引起50%的实验动物出现阳性反应时的药物剂量。【2】
实验反思
本次实验中,存在一定的整体操作问题,部分小组在腹腔注射相应剂量的药物后,观察翻正反射时间没有严格按照15min时记录,相对误差较大。部分小组等待小鼠的药效产生,经过时间较长,直至小鼠失去反射则记录阳性;或者在腹腔注射注射时,小鼠之间的间隔时间长短不一,导致药物起效时间不同,一定程度上影响了催眠反应百分率的统计。
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