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术语简介 基因和蛋白质的命名缩写： 1）基因通常用3个能反映其基本功能的斜 体小写字母表示。如：dna 基因影响DNA的 复制，rec 基因影响DNA的重组。 当几个基因影响同一过程时，通常按发 现的先后顺序加上A、B、C等。 2）对基因的蛋白质产物命名，不用斜 体，且第1个字母大写。如：dnaA和recA基 因的产物叫做DnaA和RecA 。 模板（template）: 一种使分子能按一定顺序 排列并连接形成有特定序列和功能的生物大 分子的结构。 二. 复制的起点和方向 复制是一个高度协调的过程，母链解链和复 制同时进行。 （一）概念 ● 复制子(replicon)：基因组能独立进行复制的单位。习惯上把两个相邻起始点之间的距离定为一个复制子. ● 起点(origin)：控制复制起始，是含有100～200个碱基对的一段DNA。细胞内存在着能识别起点的特殊蛋白质(大肠杆菌中称为Dna A蛋白)。 ●终点(terminus)：终止复制的序列位点. ●复制叉(replication fork)：复制开始后由于DNA双链解开，在两股单链上进行复制，形成在显微镜下可看到的叉状结构。 复制起始点、复制子与复制叉（动画演示） 三. 原核细胞DNA的复制(DNA指导下的DNA合成) （一）DNA聚合酶 ( DNA polymerase, DNA-pol ) DNA聚合酶是一种催化依赖模板的由脱氧核苷三磷酸前体合成DNA的酶。 1956 年 Arthur kornberg 等首先从大肠杆菌 中发现DNA聚合酶，其后在不同的生物中都找 到有这种酶。 DNA聚合酶的反应特点： ? 4种dNTP底物：(dATP dGTP dCTP dTTP)； ? 接受模板指导: 解开成单链的DNA母链； ? 需引物提供3′-OH； ? 新链生长方向： 5′→3′； ? 产物DNA性质与模板相同。 此外, DNA复制过程中还需其它酶和蛋白质因子. 1. 大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ— polⅠ 也称Kornberg酶, 是各种DNA聚合酶中研究 的最透彻的，它的一些特点代表了DNA聚合酶 的基本特点： （1） pol Ⅰ的性质 分子量：103 000，单链，球形，活性部位含 Zn2＋， 电镜下可以看到二聚体，每个细胞有400个酶分子。 3. 大肠杆菌DNA聚合酶 Ⅲ——polⅢ 真正的DNA复制酶，1972年发现 （1）pol Ⅲ 是真正起复制作用的酶，由10种亚基组成不对称二聚体, α、ε、θ组成核心酶 （2）功能： ① 5′→3′聚合酶活性； ② 3′→5′外切酶活性。 该酶在原核细胞中主要负责DNA链的延伸，是 复制延长中真正起催化作用的酶。 (该酶无5′→3′外切酶活性) DNA 聚合酶 polⅠ polⅡ pol Ⅲ 亚基数目 1 ≥7 ≥10 5 ′→3 ′聚合酶活性 + + + 3 ′→5 ′外切酶活性 + + + 5 ′→3 ′外切酶活性 + - - 聚合速度(核苷酸/分) 1 000-1 200 2 400 15 000-60 000 持续合成能力 3-200 1 500 ≥500 000 功能 切除引物,修复 修复 复制 1、冈崎片段和半不连续复制 （1）冈崎片段(Okazaki fragment)： 在不连续的后随链DNA合成中形成的DNA短片段，在原核生物有1000～2000核苷酸，真核生物约100～200核苷酸。1968年冈崎发现。 2、DNA半不连续复制中的RNA引物 （1）