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DNA凝胶回收
10/09 Ver.1
AxyPrep DNA 凝胶回收试剂盒
本试剂盒适合从各种琼脂糖凝胶中回收多至8 μg DNA (70bp-10Kb ),回收率为60-85% 。琼脂糖凝
胶在温和的缓冲液(DE-A 溶液)中熔化,其中的保护剂能防止线状DNA 在高温下降解,然后在DE-B 溶液
的作用下使DNA 选择性结合到膜上。纯化的DNA 纯度高,并保持片断完整性和高生物活性,可直接用于
连接、体外转录、PCR 扩增、测序、微注射等分子生物学实验。
一、试剂盒组成、贮存、稳定性
Cat. No. AP-GX-4 AP-GX-50 AP-GX-250
制备次数 4 preps 50 preps 250 preps
制备管 4 50 250
2 ml 离心管 4 50 250
1.5 ml 离心管 4 50 250
Buffer DE-A 6 ml 2 ×33 ml 2 ×165 ml
Buffer DE-B 3 ml 33 ml 165 ml
Buffer W1 2.8 ml 28 ml 135 ml
Buffer W2 concentrate 2.4 ml 24 ml 2 ×72 ml
Eluent 1 ml 5 ml 25 ml
说明书 1 1 1
Buffer DE-A:凝胶熔化剂,含DNA 保护剂,防止DNA 在高温下降解。室温密闭贮存。
Buffer DE-B:结合液(促使大于70bp 的DNA 片段选择性结合到DNA 制备膜上)。室温密闭贮存。
Buffer W1:洗涤液,室温密闭贮存。
Buffer W2 concentrate:去盐液,使用前,按试剂瓶上指定的体积加入无水乙醇(用100%乙醇或95%
乙醇),混合均匀,室温密闭贮存。
Eluent:洗脱液,室温密闭贮存。
二、注意事项
1. Buffer DE-A(含有β-巯基乙醇)、Buffer DE-B 和Buffer W1 含刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套
和眼镜,避免沾染皮肤、眼睛和衣服,谨防吸入口鼻。若沾染皮肤、眼睛时,要立即用大量清水
或生理盐水冲洗,必要时寻求医疗咨询。
2. 在步骤1 中,将凝胶切成细小的碎块可大大缩短凝胶熔化时间(线型DNA 长时间暴露在高温条件
下易于水解),从而提高回收率。勿将含DNA 的凝胶长时间地暴露在紫外灯下,减少紫外线对DNA
造成的损伤。
爱思进生物技术(杭州)有限公司 电话:0571 传真:0571E-mail: technical@
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3. 在步骤2 中凝胶必须完全熔化,否则将严重影响DNA 回收率。
4. 将Eluent 或去离子水加热至65°C,有利于提高洗脱效率。
5. DNA 分子呈酸性,建议在2.5 mM Tris-HCl,pH 7.0-8.5 洗脱液中保存。
三、实验准备
1. 第一次
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