疑难血型鉴定与疑难配血..pptVIP

感谢大家的耐心！ demeizhang@126.com Tel1．酶（除唾液酸分子，降低红细胞表面电荷） 2．聚凝胺试剂 3．聚乙二醇（浓缩抗体） 4．白蛋白添加剂（牛血清：在低离子浓度下可提高抗体浓度） 5．低离子液（大部分LISS含盐离子和大分子化合物） * 3.自身抗体 实验结果：抗-A +，抗-B +，AC +，BC +，OC +，直抗 +。 临床提示：AIHA，自身红细胞被自身抗体致敏后在含蛋白的ABO定型血清中可能发生非特异性凝集 解决办法： ----37℃盐水洗涤红细胞至直抗阴性后检定血型。 ----红细胞经甘氨酸/HCl或二磷酸氯喹放散至直抗阴性后检定血型。 2.红细胞额外反应----获得性B抗原（类B） 临床提示：细菌感染（尤其是肠道细菌感染），以前为O型或A型。 实验结果： 解决方法 ----用酸化（pH 6.0）抗-B检测（无凝集） ----吸收放散实验，吸收抗-B的能力弱，区别于亚型 *临床追踪，感染控制后“类B”现象消失 混合凝集（mf） 混合凝集（mf）： 部分红细胞凝集（大凝集块） 部分红细胞均匀分布（背景浑浊） ----近期输异型血 ----造血干细胞移植 ABO血型不同的造血干细胞移植后，如果植入存活，受者逐渐转变为供者血型的过程中，可能呈嵌合体状态。 如果供者O型，受者非O型，受者的A或B抗原逐渐减弱，抗体逐渐被检出。 是移植物存活的指标之一。 三个月内输异型血，一般直接抗人球蛋白试验（DAT）阳性 血型鉴定：毛细管离心法（分离年轻和衰老红细胞） DNA鉴定（供者白细胞在受者外周血中存活期短，一般不干扰受者DNA鉴定） RhD误定 ----D抗原阳性误定阴性，D抗原阴性误定阳性 ----特例弱D ----D抗原遮断 解决疑难血型攻略 采用最经典的试管方法 用洗涤充分的红细胞制备悬液 增加高效价人源抗血清检测 增加抗-AB、抗-H和抗A1检测 吸收放散实验 DNA检测 直抗试验 *。 血型检定，抗体筛查和交叉配血三步也是确保安全有效输血的三关，交叉配血是最后一关，也是“三关”中最重要的一关。只要交叉配血真正相合（相容），将血液输给患者才是安全的。 主侧配血----患者血清与供者红细胞配血 次侧配血----供者血清与患者红细胞配血 ----全血要求交叉配血 ----血浆则只要求ABO同型输注。 ----不含血浆的红细胞只要求主侧配血 一般情况下，只要ABO、RhD血型检定正确 供/受者ABO、RhD同型配血，多数情况是相合的 如果不相合，则视为“疑难配血” 一般只有配血相合，才能输血 配血不相合，不能输血 特殊情况例外 交叉配血的方法 聚凝胺配血？ 抗球蛋白试剂配血？ 卡式配血？ AABB推荐方法 The Antiglobulin Test Other Methods to Detect Antigen-Antibody Reactions Solid-Phase Red Cell Adherence Tests Column Agglutination Technology Enzyme-Linked Immunosorbent Assay 《全国临床检验操作规程》 第二篇临床血液学检验第六章血型血清学检查p246-271 第七节交叉配血试验p262 一、 交叉配血方法p262-264 （一）盐水介质配血法 （二）酶技术配血法 （三）抗人球蛋白配血法 (四) LISS 配血法 (五)微柱凝胶卡配血法 详见本章第四节第六部分。 第四节血清学常用检查 六、凝聚胶试验P258 第八节 微柱凝胶试验 可用于交叉配血p265 抗球蛋白试验(也成Coombs试验），它是以抗人球蛋白试剂作为连接桥，使不完全抗体致敏的红细胞连接并发生凝集。 微柱凝胶实验（简称 MCGT） 1986 年法国的Yves Lapierre 首先发明此方法, 1994年获美国FDA批准使用 ----凝胶过滤技术和免疫学的产物 ----是抗人球蛋白试验的技术延伸 原理：一定浓度的凝胶如筛子，把产生凝集的细胞团块阻挡于凝胶顶部，没有产生凝集的单个细胞则能够通过离心沉降于微管底部。 微柱凝胶实验 　4+ 3+ 　　 2+ 　　 1+ 　　　　 +/- - 溶血 　　 双群 ； 阳性 阴性 微管凝胶检测技术的关键是凝胶，通过凝胶的浓度来控制凝胶间隙的大小； 凝胶试剂中已经加好了抗球蛋白，从而简化了操作过程，只需加入样本即可； 高敏感性、高特异性和可重复性等优点； 假阴性？假阳性？质量的可靠性? LISS的应用？ 聚凝胺是一种由四个铵聚合而成的高阳离子聚合体。