栉孔扇贝（Chlamysfarreri）中抗氧化肽.PDF

第 37卷 第 1期 海 洋 与 湖 沼 Vol1 37, No11 2 0 0 6 年 1 月 OCEANOLOGIA ET LIMNOLOGIA SINICA Jan1, 2 0 0 6 (Chlamy s f arreri) * 1)  胡文婷 孙 谧 王跃军 (中国水产科学研究院黄海水产研究所 青岛 266071;青岛科技大学化工学院 青岛 266042) (中国水产科学研究院黄海水产研究所 青岛 266071) 以栉孔扇贝内脏团为原料, 对其中抗氧化肽的制备、纯化及 质进行了研究。首先 采用硫酸铵沉淀、DEAE-Sepha ex A-50 阴离子交换层析的方法, 进行了扇贝提取蛋白的制备, 其次采用海洋蛋白酶YS-80水解、Sepha exG-25凝胶层析的方法, 进行扇贝抗氧化肽的制备, 获得多肽粗品(海洋肽, PCF), 并进 一步采用 CM Sepharose阳离子交换层析和反相高效液相 色谱的方法, 对扇贝抗氧化肽进行了纯化, 结果得到组分 PCF-3A, 反相高效液相显示为单 一 峰。采用茚三酮反应、Sepha ex G-15凝胶层析和AccQ1Tag 氨基酸分析柱, 进行了 PCF-3A 的 理化 质研究。结果表明, 茚三酮反应呈阳 ; 分子量约为 794D; 由 7种氨基酸组成, 分别为 天冬氨酸、甘氨酸、苏氨酸、丙氨酸、缬氨酸、赖氨酸和脯氨酸。采用邻苯三酚自氧化体系和 Fenton反应体系对 PCF-3A 的抗氧化活 进行了研究, 发现该肽可有效清除羟自由基和超氧 阴离子, 半抑制浓度(IC )分别为 0139mg/m l和 2185mg /m,l 具有明显的抗氧化、抗衰老作用。 50 栉孔扇贝, 抗氧化肽, 分离纯化, 质 Q51413 自由基可造成机体的多种损伤和病变, 加速 师勇等, 2004; 于华华等, 2005), 海洋贝类内脏团 机体的衰老。自由基清除剂也称为抗氧化剂可 中就包含许多具有较强生理活性的蛋白质。作 清除体内多余的自由基, 从而增强机体免疫力, 者通过水解扇贝内脏团中具有抗氧化活性的蛋 延缓衰老。合成抗氧化剂, 如 BHT、BHA, 虽然有 白, 得到了抗氧化活性肽) ) ) 海洋肽 ( PCF) (王春 较强的抗氧化能力, 但是却对人体构成多种潜在 波等, 1998)。通过动物及病理模型实验表明, 该肽 的危害( Saiga et al, 2003) 。因此, 近年来寻找和 具有明显的抗皮肤衰老及抗紫外线对皮肤损伤作 开发安全、无毒的天然抗氧化剂的研究引起了广 用(刘晓萍等, 2001; 贺孟泉等, 1998), 并且对小鼠 泛关注 (沈文英等, 2004; 孙虎山等, 2005) 。以一 的肝脏和胸腺淋巴细胞的活性具有促进或保护作 定的蛋白为底物, 在适宜的酶解作用下可产生具 用(王玉贞等, 2001; 杜卫等, 2000)。本文中报道了 有抗氧化作用的肽类。Chen 等从大豆蛋白 海洋肽的制备方法, 并在此基础上进一步对其中活 ( 1998)、Suetsuna等( 2000a, b)从酪蛋白、沙丁鱼 性物质的纯化及性质进行了研究。 肉的酶解产物中均分离得到了具有抗氧化活性 1 的功能肽。酶解蛋白制备的生物活性肽具有生 111 理活性强、安全可靠等优点, 已成为新型天然抗 栉孔扇贝(Chlamysf arreri) 由黄海水产研究 氧化剂的主要来源。 所小麦岛养殖实验基地提供, 内脏团为剥