单基因遗传性疾病分子诊断.pptVIP

Amp-FLP在FVⅢ区内尚有两个VNTP区，一个位于DXS52，另一个位于DX102内，它 仍均具有复杂的多态性，亦可用于连锁分析。 School of Laboratory Medicine and Life Science, Wenzhou Medical University * 其他诊断方法 PCR-SSCP PCR-DGGE School of Laboratory Medicine and Life Science, Wenzhou Medical University * School of Laboratory Medicine and Life Science, Wenzhou Medical University * 四、苯丙酮酸尿症（PKU） （一）苯丙氨酸羟化酶（PAH）基因突变 编码PAH的基因发生突变，致使PAH活性降低或丧失 PAH突变种类达440余种，涉及13个外显子，突变的80%发生在外显子5~12编码区 中国人的PAH基因突变类型30余种，已确定20多种，大约占所有基因突变类型的80% School of Laboratory Medicine and Life Science, Wenzhou Medical University * 苯丙酮酸尿症的遗传方式：AR aa Aa Aa School of Laboratory Medicine and Life Science, Wenzhou Medical University * （二）苯丙酮酸尿症的分子诊断 PCR-STR法 我国人群中检测到9种STR（短串联重复序列）等位基因，扩增片段长度224~256pb，具有长度多态性 据此多态性，通过连锁分析可对PHA 进行诊断，该方法的诊断率达到66.2% School of Laboratory Medicine and Life Science, Wenzhou Medical University * PCR-ASO法 外显子3：111位密码子由CGA突变为TGA(终止密码)，此种突变导致合成无功能的PHA School of Laboratory Medicine and Life Science, Wenzhou Medical University * PCR-SSCP法 由于PAH突变种类多达440余种，碱基置换错义突变约占2/3， 很难用一种方法进行分子诊断 PCR-SSCP法可对未知点突变进行分子诊断，通常用于突变诊断的初筛 School of Laboratory Medicine and Life Science, Wenzhou Medical University * 未知点突变 变性聚丙酰胺凝胶电泳（单链） AA Aa aa School of Laboratory Medicine and Life Science, Wenzhou Medical University * 五、成年型多囊肾病（ APKD ） （一） APKD的遗传与基因定位 属于常染色体显性遗传病（AD） ，临床表现为腰痛，蛋白尿，血尿，高血压，肾盂性肾炎，肾结石。最终导致肾功能衰竭和尿毒症。 APKD　Gene定位16p13，但致病基因尚未克隆，无法直接诊断。 APKD Gene与α珠蛋白基因3’端附近的一段小卫星DNA序列（3’HVR）紧密连锁。 可以通过RFLP连锁分析进行诊断。 School of Laboratory Medicine and Life Science, Wenzhou Medical University * 以α 基因3’HVR为probe与PvuII酶切后的家系有关成员的Gene组DNA杂交——Southern Blot杂交 Gene组DNA PvuII酶切 电泳 probe（3’HVR） 杂交 School of Laboratory Medicine and Life Science, Wenzhou Medical University * Southern Blot杂交结果与系谱分析诊断结果 1 2 2 1 3 4 5 3.4kb 2.4kb 5.7kb School of Laboratory Medicine and Life Science, Wenzhou Medical University * （三）地中海贫血的分子诊断 地中海贫血又称海洋性贫血、珠蛋白生成障碍性贫血，是一组遗传性溶血性贫血疾病。由于遗传的基因缺陷致使血红蛋白中一种或一种以上珠蛋白链合成缺如或不足所导致的贫血或病理状态。 本病广泛分布于世界许多地区，东南亚即为高发区之一。我国广东、广西、四川多见，长江以南各省区有散发病