四氯化碳腹腔注射致大鼠肝纤维化机理研究..doc

四氯化碳腹腔注射致大鼠肝纤维化机理研究 ：叶国荣，舒建昌，何雅军，吕霞 】目的观察四氯化碳腹腔注射制作大鼠肝纤维 化模型时相关细胞因子的变化，初步探讨四氯化碳腹腔注射 致大鼠肝纤维化的机理。方法以四氯化碳腹腔注射的方法 ［四氯化碳mL(用花生油1 : 6稀释)/次，每周3次，共1 4 周］制作大鼠肝纤维化模型，设立正常、溶剂对照组，检测 血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、 透明质酸(HA)、层黏连蛋白(LN)、III型前胶原(PC III)含 量;ELISA法检测转化生因子 3 1 (TGF 0 1)、肿瘤坏死 子(TNF a);化学法检测血清氧化亚氮(NO)。肝组织行HE 和Masson胶原染色，光镜下观察病理学改变，并按SS S计 分系统进行评分。免疫组化染色观察肝组织血小板源生长因 子 BB(PDGF BB)的变化，专业图像分析软件进行图像分 析。结果与正常对照组、溶剂对照组比较，模型组血清ALT、 AST、HA、LN、PC III、NO、TGF M、TNF a 明显升高 (P 关键词】四氯化碳;肝纤维化；细胞因子 A bstract：ObjectiveT oinvestigatethevar iationofcorrelated cytokinewhentherat modelsofhepaticfib rosiswereinducedby ectionofcarbontetrintraperitonealinj ectionofcarbontetr achloride,andtothe relevantmolecularm echanism. MethodsRa tmode1sofhepaticfi brosisweremadebyin traperitonealinjec tionofcarbontetrac hlorideatmL(dilute dl * 6withpeanutoil),threetimesaweek,atotalof14weeks. The normalanddissolven tgroupswereprepare dascontrols. Seruml eve1sofALT,AST,HA, LN,PC III weredetecte d； serumlevelsofTGF P landTNF ct weredet ectedbyELISAmethod . SerumlevelsofNOwe redetectedbychemic almethod. HEandMass onstainingwerecond uctedinhepatictiss uestoobservepathol ogicalvariations. G radesofhepaticfibr osiswereevaluateda ccordingtosemi qua ntitativehistologi calscoringsystem(S SSsystem). Immunohi stochemicalstainin gwasexecutedfordet ectingPDGF BBinliv er,andprofessional softwareforimagean alysiswasused. Resu ItsCarbontetrachlo ridecouldincreaseo bviouslyserumlevel sofALT,AST,HA,LN,a ndPC III (PKeywords： c arbontetrachloride ；hepaticf ibrosis； c ytokine 肝纤维化(hepat icf ibrosis)是肝脏对各种慢性损伤的 一种修复反应，其特征是以胶原为主的细胞外基质 (extracell ularmatrix, ECM)在肝内过多沉积。在肝纤维化 的发生发展过程中，一系列的细胞因子被激活，在疾病的进 程中发挥重要的作用。常见的细胞因子有转化生因子 3 (TGF 0)、血小板源生长因子(PDGF)、肿瘤坏死因子(TNF a)、表皮生长因子(EGF)与ROS(过氧化氢、超氧游离基) 等。研究表明，相关细胞因子的表达，可以引起肝星状细胞 (hepaticstellatecell，HSC)活化，促进肝纤维化的发生发 展［1］。 四氯化碳(CC14)腹腔注射是制作肝纤维化模型的经典 方法，在前期的系列研究中曾多次采用该方法成功地建立大 鼠肝纤维化模型［2-8］，但有关其作用机制尚未阐明。既往 的研究大多数为观察四氯化碳腹腔注射造模的效果，国内少 有对其作用机理方面的研究报告。本研究拟观察CC 14制作 肝纤维化模型时相关细胞因子的变化，初步探讨CC14腹腔 注