- 1、本文档共25页,可阅读全部内容。
- 2、有哪些信誉好的足球投注网站(book118)网站文档一经付费(服务费),不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
- 3、本站所有内容均由合作方或网友上传,本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供研究参考,付费前请自行鉴别。如您付费,意味着您自己接受本站规则且自行承担风险,本站不退款、不进行额外附加服务;查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档,您可以点击 这里二次下载。
- 4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“版权申诉”(推荐),也可以打举报电话:400-050-0827(电话支持时间:9:00-18:30)。
- 5、该文档为VIP文档,如果想要下载,成为VIP会员后,下载免费。
- 6、成为VIP后,下载本文档将扣除1次下载权益。下载后,不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
- 7、成为VIP后,您将拥有八大权益,权益包括:VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
- 8、VIP文档为合作方或网友上传,每下载1次, 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等,对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
查看更多
大肠杆菌发酵培养基的优化 实验目的 1.掌握发酵培养基的配制方法 2.熟悉用正交试验优化发酵培养基的方法 3.学习比浊法测定发酵液菌浓的方法 实验原理 1.确定培养基的基本组成 2.确定所用原材料的种类 3.确定所用原材料的浓度配比关系 1.单因素法 2.正交试验法 3.均匀试验设计 1.概念 利用已经设计好的表格--正交表--来安排试验并进行数据分析的一种方法。 它是从全面试验中挑选出部分有代表性的点进行试验,这些有代表性的点具备了“均匀分散,齐整可比”的特点,是一种高效率、快速、经济的实验设计方法。 2.基本工具——正交表 记号:Ln(tm) L:正交表的符号 n:表的行数(可安排试验的次数) t:表中的字码数(水平数) m:表的列数(最多可安排因素个数) L8(27) L9(34) L16(45) 3.正交表的特点 试验点分布均匀、整齐可比 任何一列中各字码(水平)都出现,且出现的次数相等 任何两列中各横行组成的数字对,包含着所有可能的数字对,且各种数字对出现的次数相等 4.实验的基本步骤 (1)明确任务 确定指标 (2)制定因素水平表 1)确定因素(A、B、C……) 2)选择因素的变化范围 3)确定因素水平数 4)制定因素水平表 (3)设计试验方案 1)选择正交表 2)表头设计(不混杂) 3)列出试验方案 4)进行实验 直观分析法是通过对每一因素的平均极差来分析问题。 所谓极差就是平均效果中最大值和最小值的差。有了极差,就可以找到影响指标的主要因素,并可以帮助我们找到最佳因素水平组合。 极差的大小反应在所选择的因素水平范围内该因素对测定结果影响的程度。极差大的因素在所选择的因素水平范围内对测定结果的影响最大,在测试过程中必须严格控制。 B :然后对计算结果进行分析,分析各因素的主次和影响趋势,找到最优试验方案。 若某一因素k3或者k1 最大,则说明所选择的该因素的水平范围不合适, 如:对于因素C,k3最大,说明因素水平表中所设计的最高水平0.6% 不一定为最佳。如果该因素的R值较大,影响较显著,则必须进行重复实验或对照实验。 其中对照实验条件应为: 试验1: A2 B2 C3 试验2: A2 B2 C4 C4应大于C3 对照两者的结果,若试验1结果值大于试验2,则试验1条件即为最优化条件。若试验2结果值大于试验1,则应再改变因素C的水平,继续做对照实验,直至达最佳结果。 细菌培养物在生长过程中,由于原生质含量的增加,会引起培养物混浊度的增高。细菌悬液的混浊度和透光度成反比、与光密度成正比,透光度或光密度可借助光电比浊计精确测出,因此可用光电比浊计测定细胞悬液的光密度(OD值),表示该菌在特定实验条件下的细菌相对数目,进而反映出其相对生长量。 本实验以菌体生物量为指标,用四因素三水平的正交试验确定大肠杆菌的最优培养基。 实验步骤 锥形瓶培养基:标记,加棉塞、报纸包扎。 1ml移液管2支 121℃,灭菌20min 将菌种(教师预先培养好)摇匀后用无菌移液管吸取0.5ml悬液,接到每一组培养基中(接种量要完全一样) 将三角瓶置于恒温摇床中,37℃,120rpm培养12h 取下摇瓶,以空白培养基为对照,于600nm处测定各摇瓶中发酵液的OD值,填入表中。注意:如果OD值过大,需将发酵液作一定稀释后再测定。 实验结果 填写正交实验表,分析数据,确定最优培养基配方 * * 一、培养基的配制方法 二、培养基优化方法(原材料种类和浓度配比优化) 三、正交试验法 0.6 7 9 3 0.4 5 7 2 0.2 3 5 1 C蛋白胨/% B黄豆饼粉/% A淀粉/% 因素水平 1 2 3 3 1 2 2 3 1 1 2 3 1 2 3 1 2 3 1 1 1 2 2 2 3 3 3 1 2 3 4 5 6 7 8 9 结果 C B A 因素 实验号 X1 X2 X3 X4 X5 X6 X7 X8 X9 1 2 3 3 1 2 2 3 1 1 2 3 1 2 3 1 2 3 1 1 1 2 2 2 3 3 3 1 2 3 4 5 6 7 8 9 结果 C B A 因素 实验号 (4)分析试验结果 1)方法一:直接比较 2)方法二 直观分析 K最大- K最小 K最大- K最小 K最大- K最小 极差 (X1+X5+X9)/3 (X2+X6+X7)/3 (X3+X4+X8)/3 (X1+X4+X7)/3 (X2+X5+X8)/3 (X3+X6+X9)/3 (X1+X2+X
文档评论(0)