叶酸偶联5氟尿嘧啶白蛋白对肿瘤细胞的毒性及靶向性研究..doc

叶酸偶联5氟尿嘧啶白蛋白对肿瘤细胞的毒性及靶向性研究 ：张武雄，凌丽，何练芹，臧林泉，潘雪刁，朱亮 】目的研究叶酸偶联5 氟尿嘧啶白蛋白在 体外对肿瘤细胞的毒性及经叶酸受体介导的靶向性。方法选 用叶酸受体表达阳性FR(+)宫颈癌HeLa细胞及叶酸受体表迗 阴性FR(-)肺癌A549细胞进行实验。用MTT法观察叶酸偶联 物对细胞的毒性作用，同时利用游离叶酸能与叶酸偶联物竞 争性结合叶酸受体的原理，考察叶酸偶联物是否具有经叶酸 受体介导的靶向性。结果叶酸偶联物对FR(+)HeLa细胞具有 比5 氟尿嘧啶原料药更高的抑制率，能有效的靶向 FR (+) HeLa细胞，且细胞毒性作用能被过量的外源性游离叶 酸所抑制，而叶酸偶联物对FR(-)A549细胞作用很弱。结论 叶酸偶联的5 氟尿嘧啶白蛋白能经叶酸受体介导靶向于 叶酸受体丰富的肿瘤细胞。 关键词】叶酸偶联;5 氟尿嘧啶；细胞毒性；靶向性 Abstract： Ob jectiveTostudythec ytotoxicityandtarg etingabilityoffola te conjugated5 flu orouracil albuminv iafolatereceptor m ediatedendocytosis ontumorcellsinThef olatereceptorposit iveFR(+)HeLacellan dFR( )lungA549cell wereusedforexperim ent. Thecytotoxicit yofthefolate y.Accordingtotheco nprincipleanddueto ighaffinityforfola icacidwasusedtovalmpetitiveinhibitiothatfreefolatehadh tereceptor,freefolidatewhetherfolateconjugatehasthetargetingabilitytoFR(+)HeLacellviafola dThecytotoxicityof FR(+)HeLacellwasst uracilcrudedrugint n,andcouldbeinhibi icacid,whilethecyttereceptorfolaterongerthan5 y.Accordingtotheco nprincipleanddueto ighaffinityforfola icacidwasusedtoval mpetitiveinhibitio thatfreefolatehadh tereceptor,freefol idatewhetherfolate conjugatehastheta rgetingabilitytoFR (+)HeLacellviafola dThecytotoxicityof FR(+)HeLacellwasst uracilcrudedrugint n,andcouldbeinhibi icacid,whilethecyt tereceptor folate rongerthan5 mediate conjugateto fluoro hesameconcentratio tedbyexcessfreefol otoxicityonFR (-)lu ngA549cellwasveryw eak.ConclusionFolate conjugated5 flu orouracilalbuminc ouldbetargetedinto flu orouracil tumorcellswithrich folatereceptorsvia folatereceptor med iatedendocytosissi gnificantly. Key wo rds：folate conjuga ted； 5 fluorouracil ；cytotoxicity；targ eting 目前，肿瘤细胞叶酸受体受到广泛关注，已成为肿瘤诊 断和治疗研究的新靶点［1 - 4 ］。国内外研究都证明了利用叶 酸对受体的高度亲和性，可将药物-叶酸偶联物经叶酸受体 介导靶向到高度表达该受体的肿瘤细胞（如鼻咽癌、宫颈癌、 卵巢癌、乳腺癌等），这些肿瘤细胞膜表面上的叶酸受体活性 和数量显著高于一般正常细胞［5-8］，这为叶酸受体介导药 物靶向于肿瘤细胞的研究奠定了基础。据此，本研究以叶酸 为靶向基团合成了叶酸偶联的5 氟尿嘧嚏白蛋白，采用 MTT法［9］观察叶酸偶联物对肿瘤细胞的毒性作用，利用游离 叶酸能与叶酸偶联物竞争性结合叶酸受体的原理，验证该叶 酸偶联物是否具有经叶酸受体介导的靶向性。 1实验仪器与材料 实验仪器 S