医药-几种类型的小鼠缺氧实验.ppt

缺 氧 ——几种类型的小鼠缺氧实验 实验目的和要求 通过在动物身上复制乏氧性、血液性和组织中毒性等缺氧模型，观察缺氧时动物的活动、呼吸、血液和粘膜颜色等指标的改变以及动物的存活时间，加深理解各类缺氧的发病原因和机制。 实验动物 每组取成年小鼠7只，新生小鼠1只。 成年鼠称重、编号。 选出两对体重相等或最相近（误差在1g以内）的成年小鼠备用。 实验一：乏氧性缺氧 取体重相等或相近的小鼠2只，同时密闭并计时； 观察小鼠的活动、呼吸和皮肤粘膜颜色的改变，死亡时记录存活时间。 测死亡时瓶内氧浓度（同时测尚存活鼠的瓶内氧浓度）。 死后立即开胸取心血，观察血液颜色。 实验二：一氧化碳中毒性缺氧 取小鼠1只，放入指定装置，调节煤气流量（60个左右气泡/min）吸入CO。 观察指标、方法同实验一的2、4项。 实验三：亚硝酸钠中毒性缺氧 取体重相等或相近的小鼠2只； 腹腔注射给药： 0.15ml/10g体重 观察指标与方法同实验一的2、4项。 　 鼠1 鼠2 5％亚硝酸钠溶液 √ √ 1％美蓝溶液 √ 　 生理盐水 　 √ 实验四：氰化钾中毒 取健康小鼠1只，称重； 腹腔注射0.2％氰化钾（按0.15ml／10g体重注射）； 观察指标同实验一的2、4项。 实验五：年龄因素的影响 取成年鼠和新生幼鼠各1只； 新生鼠置入青霉素小瓶中，瓶口盖棉花；与成年鼠共同置入广口瓶并密闭。 观察活动、呼吸情况和存活时间。 注意事项 所用广口瓶须密闭不漏气，且各瓶容量应一致。 动物死亡后要立即取血，血液要充分与抗凝剂混合，量要准（即液滴大小相同），各管血滴数要一致，否则对比性差。试管应事先编号，以免搞错。 记录时间要准确，以一只表为准。 氰化钾有剧毒，勿沾染皮肤、粘膜，尤其是破损处。 要认真仔细观察小鼠活动情况，呼吸深度和尾、耳、口颜色的变化。 实验结果几种类型缺氧指标的改变 乏氧性 血液性 组织 年龄 玻璃珠 钠石灰 CO NaNO2+NS NaNO2+美蓝 KCN 成年 新生 存活时间（min） 血液颜色 － － 呼吸变化 － － FiO2 (％) － － － － － － 分组讨论题 各组缺氧存活时间不同及死亡的原因和机制是什么？ 各组血液颜色生成的原因；美蓝的作用是什么？ 各组的呼吸变化有何不同，为什么？ 实验一FiO2变化的原因、机制是什么？ （完） 分组讨论题 各组缺氧存活时间不同及死亡的原因和机制是什么？ 各组血液颜色生成的原因；美蓝的作用是什么？ 各组的呼吸变化有何不同，为什么？ 年龄差异对缺氧耐受有何不同，为什么？ 实验一缺氧装置的原理是什么？其中FiO2变化的原因、机制是什么？ （完） 分组讨论题 存活时间，死亡原因和机制 血液颜色 呼吸变化 FiO2变化 年龄差异 美蓝的作用 实验一装置的原理 （完） CO中毒死因 ①结合速率= = 解离速率= = 亲和力= = ②吸入气钟中CO达0.1％，血中HBCO可达50％ ③ HBCO使氧曲线左移，血液向组织释放氧减少 ④抑制RBC糖酵解，2,3-DPG减少，氧离曲线左移 亚硝酸钠中毒高铁血红蛋白血症（methemoglobinemia) HB-Fe2+ ＋ NaNO2 HB-Fe3+ ＋ NaNO 正常人MHB含量占HB总量的0.07~0.38%，相当于0.03g%左右 NaNO2中毒时MHB含量占HB总量的10%以上，相当于1.5g%以上 HB-Fe3+ ＋ 美蓝 HB-Fe2+ KCN中毒 Cyt aa3-Fe3+ ＋ CN－ → Cyt aa3-Fe3+-CN－ 幼鼠耐受缺氧的原因： 中枢方面： 神经系统发育不完善，对氧需求量少； 脑无氧酵解能力强； ATP利用率为成年的1/10； 心脏方面：心肌糖元含量高，新生30mg/g组织，成年2～4mg/g组织； 血液方面：RBC多； 细胞方面：线粒体呼吸功能强； 全身：体积小，活动少，耗能少。