滋阴明目片质量标准的研究.docVIP

滋阴明目片质量标准的研究 　　摘要：目的 建立滋阴明目片的质量标准。方法 采用薄层色谱法对滋阴明目片中的牡丹皮、山萸肉、羌活、石菖蒲进行定性鉴别，采用高效液相色谱法对丹参中的丹酚酸B进行含量测定。色谱柱为Kromasil ODS柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），以甲醇-乙腈-1.67%甲酸水（24∶10∶66）为流动相，检测波长为286 nm，流速为1.0 mL/min，柱温：30 ℃。结果 在薄层色谱中可检出牡丹皮、山萸肉、羌活、石菖蒲的特征斑点，且斑点清晰，易于观察。丹酚酸B的进样量在0.32～1.92 μg范围内线性关系良好，r=0.999 9（n=5），平均加样回收率为99.91%，RSD=0.63%（n=6）。结论 该法专属性强，重复性好，结果准确，可用于滋阴明目片的质量控制。 　　关键词：滋阴明目片；质量标准；丹酚酸B；薄层色谱法；高效液相色谱法 　　滋阴明目方是湖南中医药大学第一附属医院眼科协定处方制剂，由山萸肉、熟地黄、黄精、牡丹皮等药材组成，具有滋阴、活血、利水的功效，临床用于原发性视网膜色素变性等眼疾疗效显著[1-2]。滋阴明目片是由滋阴明目丸改剂型而成，为控制滋阴明目片的质量，确保其临床疗效，本研究采用薄层色谱法对方中牡丹皮、山萸肉、羌活、石菖蒲进行定性鉴别，高效液相色谱法对方中丹参的主要成分丹酚酸B进行含量测定。 　　1 仪器与试药 　　Agilent 1100 Series 高效液相色谱系统（安捷伦科技有限公司），KQ-600型超声波清洗器（昆山市淀山湖检测仪器厂），AR2140电子天平（奥豪斯仪器上海有限公司）。 　　牡丹皮对照药材（批号121521-200504）、山萸肉对照药材（批号121528-200408）、羌活对照药材（批号121362-200407）、石菖蒲对照药材（批号121536- 200502）、丹酚酸B对照品（批号MUST，均由中国药品生物制品检定所提供。滋阴明目方药材（湖南中医药大学第一附属医院采购，批经刘绍贵教授鉴定均符合药典标准）。乙腈为色谱纯，水为重蒸水，其他试剂均为分析纯。 　　2 方法与结果 　　2.1 薄层色谱鉴别 　　2.1.1 牡丹皮 取本品样品6.0 g，研细，加无水乙醇超声提取（功率250 W，频率40 kHz）30 min，放冷，滤过，滤液挥干，加2 mL丙酮溶解作为供试品溶液。取不含牡丹皮的阴性样品6.0 g，同法制成阴性对照溶液。另取丹皮对照药材1.0 g，同法制成对照药材溶液。照2010年版《中华人民共和国药典》（一部）附录ⅥB薄层色谱法试验[3]160，吸取供试品溶液、阴性对照溶液和对照药材溶液各10 μL，点于同一块硅胶G薄层板上，以环己烷-乙酸乙酯-冰醋酸（20∶5∶0.5）为展开剂，展开，取出、晾干，喷以2%香草醛硫酸乙醇溶液（1→10），于105 ℃烘箱加热至斑点显色清晰。供试品溶液色谱中，在与对照药材溶液相应位置上显相同颜色橘黄色荧光斑点，阴性对照溶液色谱则无此斑点。 　　2.1.2 山萸肉 取本品样品3.0 g，研细，加乙酸乙酯20 mL，超声处理20 min，滤过，滤液挥干，残渣加2 mL无水乙醇溶解作为供试品溶液。取缺山萸肉的阴性样品3.0 g，同法制成阴性对照溶液。另取0.5 g山萸肉对照药材，同法制成对照药材溶液。照2010年版《中华人民共和国药典》（一部）附录ⅥB薄层色谱法试验[3]26，吸取供试品溶液、阴性对照溶液和对照药材溶液各10 μL，点于同一块硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸（20∶4∶0.5）为展开剂，展开、取出、晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，于105 ℃加热至斑点显色清晰。供试品溶液色谱中，在与对照药材溶液相应位置显相同颜色的斑点，阴性对照溶液色谱则无此斑点。 　　2.1.3 羌活 取本品样品4.0 g，研细，加石油醚（60-90）30 mL回流提取30 min，滤过，滤液挥干，残渣加1 mL乙酸乙酯溶解作为供试品溶液。取缺羌活的阴性样品4.0 g，同法制成阴性对照溶液。另取0.5 g羌活对照药材，同法制成对照药材溶液。照2010年版《中华人民共和国药典》（一部）附录ⅥB薄层色谱法试验[3]170，吸取供试品溶液、阴性对照溶液和对照药材溶液各10 μL，点于同一块硅胶G薄层板上，以正己烷-苯-乙酸乙酯（16∶8∶8）为展开剂，展开、取出、晾干，喷以1%香草醛硫酸溶液，置365 nm紫外光灯下检视，供试品溶液色谱中，在与对照药材溶液相应位置上显相同颜色的荧光斑点，阴性对照溶液色谱则无此斑点。 　　2.1.4 石菖蒲 取取本品样品4.0 g，研细，加石油醚（60-90）30 mL回流提取30 min，滤过，滤液蒸干，残渣加1 mL石油醚