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甜椒贮藏期病原菌种类及致病性的研究 　　摘要：以亚华15品种甜椒为试材，对甜椒贮藏过程中病原菌的种类、存在部位及致病性进行研究。结果表明：甜椒贮藏前的主要潜伏侵染菌为盘长孢状刺盘孢，辣椒软腐病菌和交链孢菌，其中果蒂带菌率最高；贮藏期引起果蒂和果柄腐烂的主要致腐菌为镰刀菌和辣椒软腐病菌，主要引起果肉和果蒂发病，同时盘长孢状刺盘孢也能够引起果蒂和果肉腐烂；贮藏前的表面消毒处理可以降低贮藏期的病害发生率和发病程度。 　　关键词：甜椒；潜伏侵染菌；贮藏期病原菌 　　中图分类号：S641.3　文献标识码：A　文章编号：1006－6500(2008)04－0015－04 　　 　　甜椒是目前贮藏量和运输量较大、经济效益较高的蔬菜种类之一。由于甜椒对低温敏感，贮藏温度一般控制在8～12℃，且相对湿度较高，因此贮藏期易造成腐烂。目前，人们已从甜椒的品质和生理方面进行了大量研究。在贮藏保鲜上，尤其是在品种耐贮性、果梗对贮藏的影响、辣椒贮藏生理、辣椒保鲜剂等方面也做了许多工作。然而，研究大多集中在防治甜椒采后腐烂的各种措施上，关于甜椒病原菌种类和规律以及潜伏性侵染研究报道较少。近年来的研究表明，要从根本上解决因微生物引起的果蔬采后腐烂，必须先确定引起腐烂的主要病原菌及其侵染的主要特征，以便更有针对性地制定预防措施。笔者系统研究了甜椒贮藏期引起腐烂的主要病原菌的种类和致病性，为其采后贮运过程中的保鲜和贮藏期的预测提供参考。 　　 　　 　　1　材料和方法 　　 　　1.1材料 　　供试品种亚华15号购于市场。 　　 　　1.2方法 　　1.2.1贮藏前甜椒果实与果柄部潜伏侵染的病菌种类调查选取无病、无虫和无伤口的成熟度一致，颜色鲜艳的甜椒50只，用蘸有清水的吸水纸将果实表面的泥土擦洗干净，晾干备用。用无菌解剖刀切取果柄中部0.5cm长度、果蒂1／6且带萼片、果实中部0.5cm×0.5cm大小的组织块，分别用无菌水冲洗干净后置于超净工作台上分开晾干，随后分别将其放入70％的酒精中浸泡30s，迅速用灭菌滤纸吸干酒精，转入1％的次氯酸钠溶液中浸泡1min，用无菌水清洗3次，再用灭菌滤纸吸干组织块，植入PDA培养基，27℃恒温培养2～3d，当培养出的菌落直径1cm时，用接种针挑取菌丝尖端置于另一含PDA的培养皿内进行培养，重复上述操作2～3次即可得到纯化菌种。根据真菌菌丝、分生孢子梗及分生孢子的形态特征进行鉴定，统计辣椒不同部位的病原菌种类及数量。 　　1.2.2贮藏期病原菌的分离甜椒贮藏前进行两种处理，然后在15℃贮藏。处理I：消毒处理，先用清水将果实表面清洗干净，用干净纱布擦干，然后用75％的乙醇表面消毒，再用紫外线消毒(15w紫外灯下30cm处，照射处理30min)，最后用葡萄保鲜专用袋进行包装贮藏；处理Ⅱ：未消毒处理，将采摘的果实直接用葡萄专用保鲜袋包装贮藏。贮藏一个月时，开始调查发病部位的病原菌种类及数量，方法是在辣椒发病部位的病健交界处切取小块植物组织，进行表面消毒、分离和培养，得到不同菌株。 　　 　　1.2.3对分离得到的菌株进行病原致病性鉴定将分离纯化得到的菌株返接在寄主组织的相对应部位上，如果发病症状与该菌株分离前的发病症状一致，便可对其致病条件及侵染途径进行进一步的研究。具体方法如下： 　　(1)待返接材料的准备。选取健康无病、无虫、无伤口的辣椒，清水洗净后，用1％的次氯酸钠浸泡2min，再用无菌水冲洗干净，放在超净工作台上吹干备用。果肉、果柄和果蒂部位的返接试验分3组进行，每组15个。 　　(2)接种病原菌的制备。将待接种菌株在PDA培养基上培养5～7d，长满孢子后用无菌水配置成孢子悬浮液(浓度为在10×40倍显微镜下，每个视野20～40个孢子)。 　　(3)返接试验。把已纯化的菌株回接被测果实及果梗，分“有伤”和“无伤”两种接种方式，通过接种观察病斑发展速度和发病程度，判断被接菌株致病能力的大小。 　　(4)有伤接种。分别在不同组织部位上用接种针刺破5个孔，孔眼可集中在一起，使直径范围约5mm，用无菌毛笔蘸取菌液涂于刺伤处。 　　(5)无伤接种。直接用无菌毛笔蘸取菌液涂于接种组织部位。 　　(6)返接后培养。返接后的组织置于加湿干燥器内培养，盖口用透气薄膜隔离以达到保湿、密封、透气、防污染的作用，培养湿度为90％，温度15℃，10d后检查发病情况。 　　 　　2　结果与分析 　　 　　2.1辣椒贮藏前病原菌检测结果 　　对贮藏前的潜伏病菌进行分离与检测可以确定引起采后病原菌的最初来源，检测结果如表1。从甜椒不同组织部位分离的病菌不同，在果肉中分离得到了盘长孢状刺盘孢，青霉菌和辣椒软腐病菌；在果蒂中分离到了交链孢菌似，盘长孢状刺盘孢，青霉菌和辣椒软腐病菌；在果柄中分离得到了灰