常见的糖类脂肪蛋白质的检测.ppt

实验原理 淀 粉 还原糖 (如:葡萄糖、果糖、麦芽糖) 蛋白质 脂 肪 斐林试剂 苏丹Ⅲ染液 碘 液 双缩脲试剂 橘黄色 紫色 蓝色 水浴加热 试 剂 待检有机物 颜色变化 + + + + + 砖红色沉淀 苏丹Ⅳ染液 红色 一、还原糖的鉴定 可溶性还原糖+斐林试剂 砖红色沉淀 水浴加热 葡萄糖、果糖、麦芽糖是。 蔗糖不是 在水浴加热的条件下，还原糖和斐林试剂反应，生成砖红色沉淀。 A:实验原理： B:实验步驟： ?选材： 含糖量高，颜色为白色或近于白色。 ?制备样液：苹果块----研磨-------过滤 ? 水浴加热 苹果汁 注意：斐林试剂不稳定，一般配成甲乙液，现配现用，用时将甲乙两液等量混合后再加入样液中 斐林试剂： 甲液 0.1 g/ml的NaOH溶液； 乙液 0.05 g/ml的CuSO4溶液 苹果汁 斐林试剂 颜色变化：浅蓝色--棕色--砖红色 设置对照组 1.怎样配制斐林试剂？ 用浓度为 0.1g/ml NaOH(甲液) 与等量的0.05g/ml CuSO4 (乙液) 混合均匀而成。 NaOH + CuSO4 Cu(OH)2 蓝色沉淀 + … … Cu(OH) 2 + 还原糖 Cu 2 O 砖红色沉淀 + … … 问题思考 2. 为什么斐林试剂可检验还原糖的存在？ 斐林试剂的本质是Cu(OH)2 的悬浊液，还原糖把 Cu(OH)2 还原成Cu 2 O 沉淀。 3.为什么要用新配制的试剂？ 因为斐林试剂稳定性较差，要现用现配，混合使用。 二、脂肪的鉴定 A:实验原理: 脂肪+苏丹III染液 橘黄色 脂肪+苏丹IV染液 红色 B:实验步驟 ? 选材:花生种子最好,浸泡. ?制备样品:花生去皮------切薄片. ?鉴定: 花生切片 d 显微镜观察 c 制片 b 50%酒精漂洗 a 苏丹III染色 实验现象:脂肪+苏丹III染液 橘黄色 脂肪+苏丹IV染液 红色 显微镜 三 、 蛋白质的鉴定 A: 实验原理： 蛋白质+双缩脲试剂 紫色反应 B: 实验步驟: ?选择:大豆豆浆或鸡蛋蛋白(稀释) ,鲜肝提取液. ? 制备样液: 大豆----研磨------过滤 ? 鉴定步驟: 豆浆 b 再加双缩脲试剂B液 a 先加双缩脲试剂A液 0.1 g/ml的NaOH溶液,先为实验制造碱性环境. 0.01 g/ml的CuSO4溶液 蛋白质与双缩脲试剂发生作用，产生紫色反应 ① B液要求量适中，否则多余的B液将会与A液发生反应生成Cu(OH)2显色而遮盖原有的颜色。 ②鉴定前，留出一部分组织样液，以便对比 ③用于蛋白质鉴定的蛋清必须稀释，以免实验后粘住试管壁，不易洗刷 斐林试剂与双缩脲试剂比较 原理不同：斐林试剂的实质是新配制的Cu(OH)2溶液； 双缩脲试剂实质是碱性环境中的Cu2+。