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第二章 克隆技术 繁殖的类型: (一)有性繁殖 (二)无性繁殖 本节主要内容: 1.克隆的定义与原因; 2.克隆的三个层次; 3.克隆技术的发展; 4.克隆的条件 2.克隆的特点:其个体保持了供核体生物的遗传性状,产生后代数量多。 * * * * * * * 第一节 什么是克隆 克隆羊“多利” 多利羊诞生于1996年7月5日,1997年首次向公众披露。这是世界上第一只用已经分化的成熟的体细胞(乳腺细胞)克隆出的羊。 卵细胞 A母绵羊 B母绵羊 乳腺细胞 细胞质 细胞核 细胞核移植 早期胚胎 卵裂 C母绵羊子宫 胚胎移植 多莉羊 分娩 妊娠 融合后的卵细胞 多莉羊的培育过程: 受精卵 (合子) 胚胎 个体 精子 卵细胞 特点:具备了双亲的遗传特性 母体 新个体 定义: 种类 分裂生殖(如:变形虫、草履虫、细菌) 出芽生殖(如:酵母菌、水螅) 孢子生殖(如:青霉、曲霉、衣藻) 营养生殖(如:马铃薯、草莓) (草履虫的分裂生殖) (酵母菌的出芽生殖) 水螅的出芽生殖 草霉 营养生殖 马铃薯 一、无性繁殖与克隆 1、克隆的概念: 只要不通过两个分子、两个细胞或两个个体的结合,只由一个模板分子、母细胞或母体直接形成新一代分子、细胞或个体,叫做无性繁殖,即克隆。 3.原因:由于细胞核具有基因组全套遗传信息,生物的体细胞有潜力直接发育成胚胎和形成与核供体完全相同的个体克隆。 一、无性繁殖与克隆 1、分子水平 2、细胞水平 3、个体水平 重组载体通过宿主细胞的无性繁殖使目的基因扩增,再用某探针选取、钓取目的基因。 单克隆抗体:利用动物细胞融合技术,将永生性的骨髓瘤细胞和能产生抗体的B淋巴细胞融合,得到杂交瘤细胞,再培养,筛选到杂交瘤细胞系。 不通过两性细胞的结合,从一个单一的细胞繁殖出新的生物个体。 ——基因克隆 ——细胞系的培养(制备单克隆抗体) ——细胞 个体 二、克隆的层次 目的基因在受体细胞内扩增 导入 扩增 分子水平的克隆 单克隆抗体制备过程 注射抗原 B淋巴细胞 骨髓瘤细胞 细胞融合、筛选 杂交瘤细胞 细胞培养 筛选,继续培养 足够数量的、能产生特定抗体的细胞群 体外培养 注射到小鼠腹腔 单克隆抗体 细胞水平的克隆 个体水平的克隆
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