《4实验三细菌的芽孢染色》精选课件.pptVIP

实验三 细菌的芽孢染色及放线菌形态的观察 实验目的 掌握芽孢染色法及芽孢形态 掌握印片染色法及插片观察放线菌的形态 实验原理---芽孢染色 芽孢壁比营养细胞的细胞壁结构复杂而且致密，透性低，着色和脱色较营养细胞难。采用碱性染料并在微火上加热，或延长染色时间，使菌体和芽孢同时染色后，用蒸馏水冲洗，脱去菌体颜色，保留芽孢的颜色。并用另一种对比鲜明的染料使菌体着色。 实验原理---放线菌形态的观察 放线菌在光学显微镜下的形态 实验器材 1、材料 苏云金芽孢杆菌；吸水链孢霉；紫色直丝链孢霉 2、试剂 孔雀绿染液（5%），复红染液 3、其他 接种环、木夹、刀片等 实验步骤---芽孢染色 （1）制片 （2）孔雀石绿染色 ：加孔雀绿染液覆盖涂片区,再用木夹夹住载玻片，在微火上加热，致蒸汽徐徐冒出，保持1min （3） 冷却 、水洗、吸干 （4） 复红复染1~2min （5） 水洗、吸干 （6） 镜检 实验步骤---印片染色法观察放线菌 印片→微热固定→石炭酸复红染色 1min→水洗→晾干→镜检 实验步骤---插片法观察放线菌 用镊子轻轻取出紫色直丝链孢霉平皿中的盖玻片。 将盖玻片直接放在一块干净的载玻片上镜检。 效果如果不理想,可以用印片法观察紫色直丝链孢霉,方法同吸水链孢霉的观察. 实验作业 绘出芽孢杆菌芽孢及菌体形态图;绘出吸水链孢 霉及紫色直丝链孢霉孢子及菌丝的形态。 实验思考题 1．试比较两种观察放线菌方法的优缺点。 2．镜检时，你如何区分放线菌的基内菌丝和气生菌丝？ * * 印片：用解剖刀取放线菌培养体一块，将菌面朝上放在一载玻片上，另取一洁净载玻片置于火焰上微热后，盖在菌苔上，轻轻按压，使培养物（气丝、孢子丝或孢子）粘附（“印”）在后一块载玻片的中央，有印迹的一面朝上，通过火焰2-3次固定； *