常见的机能学实验 氨在肝性脑病发生中的作用.ppt

氨在肝性脑病发生中的作用 肝性脑病（hepatic encephalopathy HE） 继发于严重肝病的神经精神综合症 肝性昏迷 (hepatic coma) 氨中毒学说 在严重肝病时，机体内氨生成过多而肝脏 对氨的清除能力下降，致使血氨水平显著 升高，高浓度的氨通过血脑屏障进入脑组 织，引起脑功能障碍。 如何复制肝性脑病的动物模型？？ 实验目的 学习复制肝功能障碍时氨代谢异常的动物模型的方法 观察肝性脑病时机体的典型表现及血氨水平的变化 掌握肝性脑病的概念及发病机制 实验动物 家兔，体重 甲兔： 雌/雄 乙兔： 实验器材 家兔急性手术器械一套，兔固定台，粗棉线，细丝 线，1ml、 2ml、5ml、 10ml注射器各1具 ，婴儿秤、扩散瓶2个 药品 1％利多卡因，1％肝素，2.5%复方氯化铵溶液， 0.5mol/L硫酸，纳氏试剂，饱和碳酸钾 实验方法 甲兔：结扎大部肝叶＋注射复方NH4Cl 乙兔：不结扎肝叶 ＋注射复方NH4Cl 甲兔 出现大抽搐时再次放血1ml测血氨。记录所用复方NH4Cl总量和时间。 乙兔 与甲兔出现大抽搐时注射的复方NH4Cl量和时间相同时，从颈总动脉再次放血1ml测血氨。 继续推注复方NH4Cl直至乙兔出现大抽搐，记录所用复方NH4Cl总量和时间。 血氨测定方法(纳氏试剂显色法) 饱和碳酸钾溶液1ml 血液1ml 观察项目 氨在肝性脑病发生中的作用观察 组 出现大抽搐所需 出现大抽搐 血氨浓度 别 NH4Cl用量(ml) 所需时间(min) 第1次 第2 次 呼吸 肌张力 注意事项 原则上选择体重相差不超过250g的家兔进行对照 专人测定血氨 肝叶结扎线置于肝叶根部，避免勒破肝脏 复方NH4Cl切勿漏入腹腔 乙兔与甲兔同时推注复方NH4Cl或晚于甲兔？？ 发生大抽搐时迅速放血 讨论要点 1.肝性脑病的概念 2.模型是如何复制的（氨中毒学说） 3.实验数据横纵向对比分析 4.实验现象的分析（氨对脑的毒性作用） 观察项目 呼吸运动、肌张力、抽搐。 氨在肝性脑病发生中的作用观察 组 出现大抽搐所需 出现大抽搐 血氨浓度 别 NH4Cl用量(ml) 所需时间(min) 第1次 第2次 氨对脑代谢功能的影响 1、干扰脑细胞能量代谢 2、使脑内神经递质改变 3、氨对神经细胞膜的抑制作用 参考结论： 血氨增高是肝性脑病的重要诱因 甲兔为肝性脑病，乙兔为急性氨中毒 肝脏具有解氨毒的作用，但有一定限度 氨对大脑具有毒性作用 * * * * * * 欣快、反应迟缓、睡眠节律的变化，有轻度的扑翼样震颤 前驱期 扑翼样震颤 Flapping tremor 行为异常、嗜睡 、定向 理解力减退及精神错乱， 经常出现扑翼样震颤 昏迷前期 明显的精神错乱、昏睡等症状 昏睡期 神志丧失、不能唤醒，没有扑翼样震颤 昏迷期 肝性脑病的发生机制 肝性脑病 氨中毒学说 假性神经递质学说 γ-氨基丁酸学说 血浆氨基酸失衡学说 氨的来源增多 氨的清除减少 肠腔注射复方氯化胺 肝叶结扎 剑突下做一6-8cm长切口------避免气胸 称重、分组----甲兔和乙兔重量相同/相近 固定----------四肢伸展仰卧位？ 剪毛、麻醉（各2ml）----颈部、上腹部局部麻醉？ 甲兔结扎肝叶，找到十二指肠，穿牵引线 乙兔不结扎肝叶，找到十二指肠，穿牵引线 颈总动脉插管---取血1mL测血氨(取血后肝素化) 提前取 胶布 剪口 游离长度 × √ 向肠腔注射复方NH4Cl（5ml/5min) 小结 第一次取血时间 第二次取血时间、弃掉肝素 停止注射复方NH4CL 注射器的使用 大抽搐：四肢伸直，坚硬如柱，头尾昂起，脊柱挺硬 迅速 　　 立即以玻璃棒蘸硫酸1滴 迅速盖上扩散瓶 倾斜扩散瓶将血液及碳酸钾充分混匀 （45度角旋转10分钟，放置１0分钟） 取出玻棒,取纳氏试剂3ml将玻棒上含氨硫酸洗入试管中 肉眼观察液体颜色,颜色深浅反映血液氨的浓度高低 (可用—、±、+、++、+++、++++表示颜色深浅) ※玻棒用前调整好高度 ※蘸液约1cm ※勿使玻棒与血液及瓶内壁接触 提前 甲兔 乙兔 0