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第二章 蛋白质的结构与功能 Chapter 2 Structure and Function of Protein 主 要 内 容 蛋白质的分子组成 蛋白质的分子结构 蛋白质的理化性质 蛋白质的分离纯化 蛋白质(Protein)的种类繁多 大肠杆菌约含蛋白质3 000种,人体内含蛋白质10万 余种。 蛋白质是生命的物质基础 1.催化功能 2.调节功能 3.支持功能 4.运输功能 5.营养功能 6.运动功能 7.防御功能 8.识别功能 9.信息传递功能 10.凝血与抗凝血功能 第一节 蛋白质的分子组成 一、蛋白质的元素组成 C 50~55% H 6~7% O 19~24% N 13~19% S 0~4% 有些蛋白质还含有P、Fe、Cu、Mn、Zn、Se等。 各种蛋白质含氮量接近,平均为16%;样品测定中1克氮相当于含6.25克蛋白质(凯氏定氮法) 。 二、蛋白质的基本组成单位——氨基酸 蛋白质受酸、碱或蛋白酶水解产生游离氨基酸。因此,组成蛋白质的基本单位是——氨基酸(amino acid) 。 (一)氨基酸的分类 根据R侧链基团的结构和性质的不同,可将 20种氨基酸分为4类: 1.非极性疏水性氨基酸 2.极性中性氨基酸 3.酸性氨基酸 4.碱性氨基酸 氨基酸的等电点(isoelectric point,pI) 在某一pH溶液中,氨基酸解离成阳离子和 阴离子的趋势及程度相等,成为兼性离子,呈电 中性,此时溶液的pH称为该蛋白质的等电点。 氨基酸分析仪图解 (2)与亚硝酸反应:Van Slyke 法测定氨基酸 氨基酸的氨基在室温下与亚硝酸作用,生成氮气。通过在标准条件下测定生成的氮气体积,即可计算出氨基酸的量。 生成的氮气只有一半来自氨基酸。 可用于氨基酸定量和蛋白质水解程度的测定。 三、氨基酸在蛋白质分子中的连接方式 (一)肽键和肽 肽键(peptide bond)是由一个氨基酸分 子的α-羧基与另一个氨基酸的α-氨基脱水缩合 形成的化学键。 第二节 蛋白质的分子结构 蛋白质是由许多氨基酸单位通过肽键连接形成的具有特定分子结构的高分子化合物。 蛋白质的分子结构可分为一级、二级、三级和四级。一级结构是蛋白质的基本结构,二级、三级、四级结构称为高级或空间构象。 一、蛋白质的一级结构 概念 是指蛋白质分子中氨基酸的排列顺序。 主要的化学键 肽键、有些蛋白质还含有二硫键。 一级结构是决定蛋白质空间构象和特异生物学功能的基础,但不是决定蛋白质空间构象唯一因素。 二、蛋白质的空间结构 空间结构 指蛋白质分子内各原子围绕某些共 价键的旋转而形成的各种空间排布及相互关系,称为蛋白质的构象。 蛋白质的构象分为主链构象和侧链构象。 (一)蛋白质的二级结构 概念 是指蛋白质多肽链主链原子局部的空间排列,不涉及氨基酸残基侧链的构象。 维系蛋白质二级结构的主要化学键是氢键。 2.蛋白质二级结构的主要形式 α-螺旋 β-折叠 β-转角 无规卷曲 (1) α-螺旋 (2)β-折叠 β-折叠包括平行式和反平行式两种类型 (3)β-转角 (4)无规卷曲 是指多肽链中除了以上几种比较规则 的构象外,其余没有确定规律性的那部分 肽链构象。 (二)蛋白质的三级结构 概念 是指整条肽链中所有原子的空间排布,它包括主链构象和侧链构象。 主要化学键 疏水键、氢键、盐键等非共价键和二硫键。疏水键是维持三级结构稳定的最主要作用力。 由一条多肽链形成的蛋白质,其最高级结构为三级结构。只有具有三级结构的蛋白质才具有生物学活性。 蛋白质结构中应注意的几个问题 由一条多肽链形成的蛋白质其最高级结构为三 级,具有三级结构的蛋白质才具有生物学活性。 形成蛋白质的四级结构至少要有两条多肽链。 两条或两条以上的多肽链靠共价键连接的蛋白质没有四级结构。 由一条多肽链形成的蛋白质与亚基不同。 三、蛋白质的结构与功能 ?蛋白质一级结构与功能的关系 一级结构决定蛋白质的空间结构; 一级结构决定蛋白质的生物学功能。 蛋白质空间结构与功能的关系 蛋白质构象是其生物学功能的基础, 构象改变功能改变。 第三节 蛋白质的理化
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