医疗医学实验 DNA和RNA在细胞中的分布.ppt

实验原理： DNA主要分布在 内，RNA大部分存在于 中。 甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA的 不同，甲基绿使 呈现绿色， 使 呈现红色。利用 染色剂将细胞染色，可以显示DNA和RNA在细胞中的分布。 盐酸 目的要求： 方法步骤： 观察DNA和RNA在细胞中的分布 2011-10-8 实验 2011-10-8 ①能改变 →加速染色剂进入细胞 ②能使染色质中的 分离→有利于 结合 细胞膜的通透性 DNA和蛋白质 DNA和染色剂 细胞核 细胞质 亲和力 DNA 吡罗红 RNA 甲基绿吡罗红混合 初步掌握观察DNA和RNA在细胞中分布的方法 实验材料： 人的口腔上皮细胞；洋葱鳞片叶内表皮细胞； 1、能否用哺乳动物成熟的红细胞？2、能否用紫色洋葱鳞片叶外表皮细胞？ 无细胞核 避免颜色干扰 尽量避免材料上带叶肉组织细胞 一、制片 2、用消毒牙签刮漱净的口腔内侧壁取口腔上皮细胞后涂NaCl液滴上 3、将涂有口腔上皮细胞的载玻片在酒精灯上烘干 1、在载玻片上滴一滴质量分数为0.9%的NaCl溶液（生理盐水） 目的：维持口腔上皮细胞的正常形态 思考：如果用植物细胞的话，需要滴加生理盐水吗？ 目的：将细胞固定在载玻片上 注意事项：1、烘烤时要来回移动玻片，以免受热不均炸裂；2、烘烤后，等玻片冷却后再放入盛HCl的烧杯中，以免炸裂。 二、水解 1、在小烧杯中加入30ml质量分数为8%的HCl，将烘干的载玻片放入小烧杯中； 2、再将小烧杯放入盛有30℃温水大烧杯中保温5min。 目的：杀死细胞，改变细胞膜的通透性，加速染色剂进入细胞；使染色质中DNA与蛋白质分离，有利于DNA与染色剂的结合 注意事项： 时间长，会严重破坏细胞结构，干扰DNA和RNA的观察； 时间短，水解不彻底，染液不易进入细胞，染色不充分。 三、冲洗 取出载玻片，用蒸馏水的缓水流冲洗载玻片10秒 注意事项：冲洗时一定要用缓流，防止细胞被冲走 目的：防止HCl与染色剂发生中和作用而影响观察效果 四、染色 1、将吡罗红甲基绿染色剂滴2滴于擦干的载玻片上，染色5min 2、吸去多余的染色剂，盖上盖玻片 （1）先用低倍镜观察，选择染色均匀、颜色浅的区域进行观察 （2）换用高倍镜观察，观察细胞核和细胞质的染色情况 五、观察 实验现象:绿色部分主要集中在细胞核内，红色部分主要集中在细胞质中。 实验结论:DNA主要分布在细胞核中, RNA大部分存在于细胞质中. 1、在“观察DNA和RNA在细胞中的分布”实验中，将口腔上皮细胞置入8﹪的盐酸溶液中水解的主要目的是 A．使细胞中的DNA水解成脱氧核苷酸 B．使细胞中物质全部水解 C．利用盐酸改变细胞膜的通透性，加速染色剂进入细胞 D．使染色体中的DNA与蛋白质分离，有利于蛋白质与染色剂结合 2、观察DNA和RNA在细胞中的分布实验中，水解步骤需要的条件是 ①5％的盐酸 ②8％的盐酸 ③10％的盐酸 ④20℃温水 ⑤30℃温水 ⑥40℃温水 ⑦保温5min ⑧保温10min A．①④⑦ B．②④⑧ C．①⑤⑧ D．②⑤⑦ 3、利用甲基绿和吡罗红对细胞中的DNA、RNA染色时，试剂的正确使用方法是 A．先加甲基绿，再加吡罗红 B．先加吡罗红，再加甲基绿 C．混合在一起同时使用 D．将两种试剂分开单独使用