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3.配制培养基的原则 (1)目的要明确 (2)营养要协调 (3)pH要适宜 4.消毒与灭菌的比较 二者的区别:前者去除的是部分微生物,后者去除的是所有微生物。 5.三种常用灭菌方法的比较 6.倒平板的注意事项 (1)培养基灭菌后,需要冷却到50~60 ℃后,才能用来倒平板。可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶,感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时,就可以进行倒平板了。 (2)倒平板前,要将装有培养基的锥形瓶瓶口通过火焰灼烧,以防止瓶口的微生物污染培养基。 (3)平板冷凝后,需将平板倒置。平板冷凝后,皿盖上会凝结水珠,凝固后的培养基表面的湿度也比较高,将平板倒置,既可以使培养基表面的水分更好地挥发,又可以防止皿盖上的水珠落入培养基,造成污染。 (4)倒平板过程中,如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位,空气中的微生物可能会在皿盖与皿底之间的培养基上滋生,因此不要再继续使用这个平板培养微生物。 题型一 题型二 题型三 题型四 微生物的营养 【例题1】 下列关于微生物的营养的说法,正确的是( ) A.同一种物质不可能既作碳源又作氮源 B.凡是碳源都能提供能量 C.除水以外的无机物仅提供无机盐 D.无机氮源也可能提供能量 解析:对某些微生物来说,含C、H、O、N的化合物既可以作为碳源,又可以作为氮源。CO2可以作为光能自养微生物的碳源,但不能提供能量。CO2和N2是无机物,也可以分别作为微生物的碳源和氮源。硝化细菌所利用的氮源是无机氮源氨,同时氨也为硝化细菌提供用以化能合成作用的能量。 答案:D 题型一 题型二 题型三 题型四 易错警示含C、H、O、N的化合物既可以作为一部分微生物的碳源,又可以作为氮源;有机碳源能提供能量,无机碳源不能提供能量。 题型一 题型二 题型三 题型四 无菌操作相关技术 【例题2】 细菌培养过程中分别采用了高压蒸汽、酒精、火焰灼烧等几种不同的处理方法,这些方法依次用于杀灭哪些部位的杂菌?( ) A.接种针、手、培养基 B.高压锅、手、接种针 C.培养基、手、接种针 D.接种针、手、高压锅 解析:高压蒸汽灭菌锅通常用于培养基的灭菌。用酒精擦拭双手可以进行消毒。火焰灼烧可以迅速彻底地灭菌,适用于微生物的接种工具,如接种针。 答案:C 题型一 题型二 题型三 题型四 反思领悟微生物培养过程中的无菌操作包括消毒和灭菌两大类,各自具有不同的方法。应对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒;对用于培养微生物的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌。 题型一 题型二 题型三 题型四 培养基的制备 【例题3】 下列关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述,错误的是( ) A.操作顺序为称量、溶化、分装、调pH、加塞和包扎、灭菌、摆斜面及倒平板 B.将配制的培养基分装入试管或锥形瓶内 C.待培养基冷却至50~60 ℃后,制成斜面或平板后备用 D.配制好的培养基必须立即灭菌 解析:制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作顺序是称量、溶化、调pH、分装、加塞和包扎、灭菌、摆斜面及倒平板。 答案:A 题型一 题型二 题型三 题型四 选择培养基的特点与应用 【例题4】 氯苯化合物是重要的有机化工原料,不易降解,会污染环境。某研究小组依照下列实验方案(图甲)筛选出能高效降解氯苯化合物的微生物SP1菌。培养基配方如下表。 -*- 目标导航 知识梳理 重难聚焦 典例透析 随堂演练 随堂演练 随堂演练 随堂演练 随堂演练 1.能说出培养基的类型、用途和基本成分。 2.比较消毒和灭菌的区别。 3.举例说明常用的消毒与灭菌的方法。 4.能记住培养基的配制方法。 5.研究培养基对微生物的选择作用。 一 二 一、培养基的制备 1.培养基 (1)概念 培养基是人工配制的适合微生物生长繁殖或积累代谢产物的 营养基质,用以培养、分离、鉴定和保存各种微生物。 (2)成分 一般包括水分、碳源、氮源、微量元素和无机盐等。 (3)种类 培养基按物理状态可分为液体培养基和固体培养基。后者常用琼脂做凝固剂。 一 二 2.培养基的配制和灭菌 (1)培养基的制备包括配制和灭菌两大步骤。 (2)配制关键:准确称量、调准pH、规范制作棉塞、彻底灭菌。 (3)主要制作流程:称量→溶化→调pH→分装→加塞和包扎→ 灭菌→摆斜面及倒平板。 (4)由于配制培养基的各类营养物质和容器等含有多种不同的微生物,配制好的培养基必须立即灭菌,及时杀灭培养基中的微生物,同时防止微生物大量繁殖造成的培养基营养成分的改变。 (5)常用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌法。通过高压、高温蒸汽使菌体蛋白质凝固变性以达到灭菌的目的。 一 二 思考: 日常生活中的牛奶在进入市场销售前要进行消毒,可采用哪种消毒方法呢? 提示:用巴氏消毒法对牛奶进行消毒,可以杀死牛奶中的微生物,同时使牛奶的营养成分不会被破坏
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