医疗医学实验二 徒手切片及植物细胞观察.ppt

实验目的 1.进一步掌握临时装片的制作方法，学习和掌握植物徒手切片技术 2.了解植物细胞的基本结构 3.掌握质体、纹孔和胞间连丝的结构形态 4.识别和鉴定植物细胞中常见的后含物 实验相关理论 一、徒手切片 二、植物细胞结构 三、胞间连丝和纹孔 四、质体 五、植物细胞后含物 一、徒手切片 1.玻片的分类 从保存时间长短分：临时玻片和永久玻片 从制作方法分：切片、涂片、装片、压片 2.徒手切片 切片技术又分为：徒手切片、滑行（走）切片、石蜡切片等 徒手切片：不经任何处理、用刀或徒手切片器切片；方法简单、制片迅速、及时观察到活体组织的结构颜色；切片厚度不均、不能连续切片 3.徒手切片的制作 1）选材：一般选择发育正常、软硬适中的材料。材料太硬时，需进行软化处理；材料太软时，可用胡萝卜肉根等作支持物，把材料夹在其中进行切片。对有些植物的叶片可卷成筒状进行切片。 所取的新鲜材料应及时放入水中，以免徒手切片时萎蔫。 2）切片 ① 先把欲切的材料用刀片削成大小适宜的段块，并将切面削平，然后将材料和刀片蘸水湿润（以后每切一片都要用水湿润）。 ② 用左手的拇指、食指和中指夹住材料。为防止切片时割伤手指，应使材料上端（切面）略高于食指，拇指略低于食指。用右手的拇指和食指捏住刀片一端，置于右手食指之上，刀片与材料切面平行，刀刃放在材料左前方稍低于材料断面的位置。 ③ 以均匀的力量和平稳的动作使刀刃自左前方向右后方斜滑拉切，注意不要直切，中途不停顿，拉切速度要快，不要推前拖后（拉锯式）切割，左手食指向下稍微移动，使材料略有上升，从而调动每张切片的厚度。切片过程中右手不动，只是右臂移动，动作用臂力而不用腕力。 ④ 切片要薄、平而完整，将切下的切片用毛笔刷蘸水从刀片上轻轻移入培养皿的清水中或直接将刀片浸没于水中使切片漂洗下来。 ⑤ 装片制作 ⑥ 简单染色 二、植物细胞结构 三、纹孔和胞间连丝 纹孔 植物细胞上的特殊结构，是相邻细胞之间物质和信息传递的通道，在两个相邻细胞壁上呈念珠状存在。 胞间连丝 许多纤细的原生质丝穿过初生壁上微细孔眼或从纹孔穿过纹孔膜，连接相邻细胞，这种原生质丝称为胞间连丝。 植物体全株的各种细胞之间均有纹孔和胞间连丝，相互沟通，使植物成为一个统一的有机整体。 四、质体 是绿色植物特有的细胞器。根据色素不同可分为三类： 叶绿体、有色体和白色体（无色素） 五、植物细胞后含物 细胞在代谢过程中产生并贮藏在细胞内的营养物质和废物等统称为后含物。后含物有的存在于液泡中，有的分散于细胞质中 常见的营养物质：淀粉、蛋白质、油脂等 常见的代谢废物：晶体 1.淀粉粒 光合作用制造的葡萄糖，除当时供应植物生长需要外，剩余的转化为淀粉。在细胞中以颗粒状态存在称为淀粉粒。 2.蛋白质（糊粉粒） 蛋白质一般以糊粉粒的形式存在于细胞的任何部位，如液泡、细胞质、细胞核和质体中，常呈无定形的小颗粒或结晶体。 3.油脂 脂肪和油脂广泛地分布在植物细胞内，化学结构很相似。常温下，为固体的称为脂肪，呈液态的称为油脂。 4.晶体 一般认为结晶是由细胞中代谢废物沉积而成，以避免对细胞的毒害。从化学成分上看主要有草酸钙结晶和碳酸钙结晶。 草酸钙晶：普遍存在，有单晶（方晶）、针晶、簇晶、砂晶、柱晶 碳酸钙结晶（钟乳体）：仅存在于少数植物中，常与叶表皮层的细胞层结合成一个柄状物，悬挂于膨大的表皮细胞中，呈瘤状或桑椹状 材料和器材 1.材料 菠菜、胡萝卜、马铃薯块茎、花生、柿子椒、印度橡皮树叶片、小麦籽粒 2.试剂 苏丹Ⅲ溶液、I2-KI溶液、1mol/l的盐酸溶液、蒸馏水 3.器材 显微镜、搪瓷盘、双片刀片、单面刀片、镊子、毛笔、培养皿、载玻片和盖玻片、擦镜纸、吸水纸、纱布 实验步骤 1. 纹孔和胞间连丝——红辣椒果皮细胞 取一小块红辣椒果皮，用刀片刮去果肉，仅存留透明状的一层外果皮，制成临时装片，观察纹孔和胞间连丝 2. 叶绿体——菠菜叶肉细胞 用镊子撕一块带有叶肉细胞的菠菜叶下表皮，反转置于载玻片上的水滴中，加盖玻片观察，观察叶绿体的形状和分布并画图 3. 有色体——胡萝卜根细胞 取胡萝卜根做徒手切片，观察有色体的形状和分布，红辣椒果皮中也含有有色体，比较两种有色体形状。 4. 淀粉粒——土豆块茎细胞 用单面刀片在土豆块茎上取大小适宜的段块,制作徒手切片，镜下观察。观察淀粉粒的形状、大小、轮纹、脐的特征及在细胞中的分布情况，画图。 5. 蛋白质——小麦粒 取水浸泡软的小麦粒，制作徒手横切片，紧靠种皮部分有一层排列整齐的方形