2018_2019高中生物第2章酶技术2.2酶活力的测定课件北师大版选修1.ppt

题型一 题型二 答案:(1)出汁率　澄清度 (2)①方法二　方法二的操作能够确保酶的反应环境从一开始便达到实验预设的pH环境(或回答“方法一的操作会在达到预定pH之前就发生酶的催化反应”也可) ②使酶和反应物(果胶)充分地接触 ③果汁体积　甲　如下图所示 -*- 目标导航 知识梳理 重难聚焦 典例透析 随堂演练 随堂演练 随堂演练 随堂演练 1.记住酶活力的概念。 2.阐明检测果胶酶活性的方法。 3.探究温度、pH和酶浓度对果胶酶活性的影响。 一 二 三 一、酶活力单位 为了表示酶活力的大小,人们规定了酶活力单位。在一定条件下,1 min内能转化1 μmol底物的酶量称为一个酶活力单位。温度保持在25 ℃,其他条件如pH和底物浓度等均应采用最适条件。? 一 二 三 二、检测果胶酶的活力 1.原理 果胶酶可将果胶分解生成β-半乳糖醛酸,β-半乳糖醛酸可用 次碘酸钠法进行定量测定。根据测定得到的β-半乳糖醛酸的量可以计算出果胶酶的活力。 2.方法步骤 保温→加碘氧化→滴定→计算。 思考： 酶活力的表示方法是什么? 提示:用一定条件下酶所催化的某一化学反应的反应速率来表示。 一 二 三 三、影响酶活性的因素 绝大多数酶是有活性的蛋白质,酶活力测定就是对其所催化的化学反应速度的测定。酶对底物的作用是在一定环境条件下进行的,这些环境条件包括底物浓度、酶浓度、环境温度、环境pH、 激活剂和抑制剂等,所以影响酶活力的因素很多。 1.酶活力测定方法 测定酶活力,可用物理法、化学法或酶分析法等方法。常用的方法:一是在适当的条件下,把酶和底物混合,测定生成一定量产物所需的时间,也称终点法;二是将酶和底物混合后隔一定时间,间断地或连续地测定反应的连续变化,如吸收度的增加或减少;三是将酶与底物混合后,让其反应一定时间,然后停止反应,定量测定底物减少或产物生成的量。 2.测定酶活力时的注意事项 (1)酶促反应过程中,只有最初一段时间内反应速度与酶浓度成正比,随着反应时间的延长,反应速度逐渐降低。 (2)要规定一定的反应条件,如时间、温度、pH等,并在酶测定过程中保持这些反应条件的恒定,如温度不得超过规定温度的±1 ℃,pH应恒定。 (3)配制的底物浓度应准确且足够大,底物中应加入不抑制该酶活力的防腐剂并保存于冰箱中,以防止底物被分解。 (4)标本要新鲜,由于绝大多数酶会因久置而活力降低,当标本无法及时测定时,应保存于冰箱中。 (5)在测定过程中,所用仪器应绝对清洁,不应含有酶的抑制物,如酸、碱、蛋白沉淀剂等。 3.进行各因素对果胶酶活性的影响探究实验时需要注意的事项 (1)在探究温度或pH的影响时,需要设置对照实验,不同的温度梯度之间或不同的pH梯度之间可以作为对照,这种对照称为相互对照。只有在实验中保证一个自变量,实验结果才能说明问题。 (2)在混合果泥和果胶酶之前,要将果泥和果胶酶分装在不同的试管中恒温处理。这样可以保证底物和酶在混合时的温度是相同的,避免了果泥和果胶酶混合时影响混合物的温度,从而影响果胶酶活性的问题。 (3)在果胶酶处理果泥时,为了使果胶酶能充分地催化反应,应用玻璃棒不时搅拌。 题型一 题型二 酶活力的检测及影响酶活力的因素 【例题1】 果胶是植物细胞壁以及胞间层的主要成分之一。果胶酶能够分解果胶,瓦解植物的细胞壁及胞间层。请完成以下有关果胶酶和果汁生产的问题。 (1)在果汁生产中应用果胶酶可以提高　　　　　　和　　　　　　。? (2)某实验小组进行了“探索果胶酶催化果胶分解最适宜的pH”的课题研究。本课题的实验步骤中,在完成“烧杯中分别加入苹果泥、试管中分别注入果胶酶溶液、编号、编组”之后,有下面两种操作。 方法一:将试管中果胶酶溶液和烧杯中的苹果泥相混合,再把混合液的pH分别调至2,3,4,…,8。 题型一 题型二 方法二:将试管中果胶酶溶液和烧杯中苹果泥的pH分别调至2,3,4,…,8,再把pH相等的果胶酶溶液和苹果泥相混合。 ①请问哪一种方法更为科学?　　　　。说明其理由。　??　。? ②实验操作中要用玻璃棒不时搅拌,其目的是　　　　　,以减少实验误差。? ③如果用曲线图的方式记录实验结果,在现有的条件下,当横坐标表示pH,纵坐标表示　　　　　　　　时,实验的操作和记录是比较切实可行的。根据酶的特性,在下图中选择一个最可能是实验结果的曲线图:　　　。若实验所获得的最适pH=m,请你在所选的曲线图中标出“m”点的位置。? 题型一 题型二 解析:果胶酶可以提高果汁的出汁率和澄清度。方法二是将试管中的果胶酶溶液和烧杯中苹果泥的pH分别调至2,3,4,…,8,再把pH相等的两溶液相混合,这样操作能够确保酶的反应环境从一开始便达到实验预设的pH环境,减少误差。实验操作中要用玻璃棒不时